The clinical utility of PCR using the Cobas Amplicor MTB test for the diagnosis of pleural tuberculosis

Abstract

[한글]목적: 결핵성 흉막염의 진단에 있어서 흉수에 대한 중합효소연쇄반응 검사는 매우 낮은 민감도를 보였으며, 이는 흉수 내의 결핵균의 수가 적은 데에 기인하는 것으로 추정된다. 이번 연구에서는 흉수의 검체양을 증가시켰을 때 결핵성 흉수에 대한 중합효소연쇄반응 검사의 민감도가 향상되는지를 알아보고자 하였다.방법: 결핵성 흉막염에 대한 감별 진단이 필요하였던 53명의 환자에 대하여 전향적인 연구를 시행하였다. 각각의 환자로부터 얻은 흉수를 10 ml, 25 ml, 50 ml로 양을 달리 하여 결핵균에 대한 중합효소연쇄반응 검사를 시행하였으며, Cobas Amplicor MTB (Roche Diagnostic Systems)를 이용하였다. 결핵성 흉막염은 흉수에서 결핵균이 배양된 경우, 흉막 생검에서 결핵이 진단된 경우, 가래에서 결핵균이 배양된 경우 및 기타 원인이 배제된 상태에서 임상적으로 결핵성 흉수가 의심되었고 항결핵제 투약으로 흉수가 호전된 경우를 포함하였다.결과: 53명의 환자 중 26명이 결핵성 흉막염으로 진단되었다. 흉수에 대한 항산균 바름질, 결핵균 배양, 아데노신 디아미나아제 측정 및 흉막 생검의 민감도는 각각 3.8%, 15.4%, 88.5%, 84.6%이었다. 10 ml, 25 ml, 50 ml의 흉수를 이용한 결핵균 중합효소연쇄반응 검사는 각각 3명 (11.5%), 4명 (15.4%), 3명 (11.5%)에서 양성이었으며, 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다 (p >0.05, symmetry exact 검사).결론: 결핵균의 수가 극히 적을 것으로 예상되는 흉수 등의 검사물에 대해서는 결핵균 중합효소연쇄반응 검사의 임상적 유용성이 극히 제한적이며, 검사물의 양을 증가시키더라도 민감도는 향상되지 않는다.

[영문]Objectives: For the diagnosis of pleural tuberculosis, polymerase chain reaction (PCR) of pleural effusion specimens has shown very low sensitivity, which might be due to the small number of bacilli in the samples. The purpose of this investigation is to determine whether the sensitivity of PCR testing can be improved when increasing the amount of pleural effusion specimens.Methods: We prospectively analyzed pleural effusion specimens obtained from 53 patients for whom the exclusion of the possibility of tuberculous pleural effusion was necessary. We performed Mycobacterium tuberculosis PCR testing using the Cobas Amplicor MTB test (Roche Diagnostic Systems) with three different amounts (10ml, 25ml, and 50ml) of pleural effusion specimen in each patient. Pleural tuberculosis was defined as having one of the following: culture-positive pleural fluid sample, histopathologic finding consistent with tuberculosis on pleural biopsy, culture-positive sputum specimen, and/or positive response to anti-tuberculous medication without other possible causes of pleural effusion.Results: Of the 53 patients, 26 received the diagnosis of pleural tuberculosis. The sensitivities of AFB smearing, Mycobacterium tuberculosis culture of pleural effusion specimen, pleural biopsy, and measurement of ADA were 3.8%, 15.4%, 84.6%, and 88.5%, respectively. The results of PCR testing were positive for 3 (11.5%), 4 (15.4%), and 3 (11.5%) of the 26 patients when using 10ml, 25ml, and 50ml of pleural effusion specimens, respectively. These results did not show a statistically significant difference in the sensitivity of PCR testing when increasing the amount of pleural effusion samples (p >0.05, symmetry exact test).Conclusions: For specimens such as pleural effusion, in which the bacillary load is very low, the clinical utility of PCR testing seems highly limited with the kits designed for the diagnosis of pulmonary tuberculosis. An increased amount of pleural effusion sample does not improve the sensitivity of PCR testing.