알레르기 질환에서 고양이털의 감작율과 항원성에 관한 연구

Abstract

[한글]

동물의 털이나 상피가 여러 알레르기 질환에서 원인 항원으로 관여하는 것이 알려져있으며 흔히 접할 수 있는 개나 고양이에 대한 연구가 비교적 많이 되고 있다. 최근 우리나라 알레르기 환자들에서 피부단자시험상 고양이털 항원에 대해 19∼31%의 높은 양성율이

관찰된 바 있으나 이제까지 피부반응검사에 사용되었던 고양이털 항원(Bencard 사)의 순수도가 의문시되며 실제우리나라 알레르기환자에서 접할 수 있는 고양이털 항원에 대한 정확한 연구는 되어 있지 않다.

이에 연구자는 고양이털이 원인 항원으로 작용하는 정도와 항원성을 연구하기 위해 비교적 순수하다고 알려진 일본 Torii 사의 고양이털 항원을 이용하여 1991년 3뭘 1일부터 1992년 2월 28일까지 피부단자시험을 시행한387례를 분석하였으며 1993년 1월부터 본원

알레르기 특수 크리닉을 내원한 89명의 환자를 대상으로, 자가 고양이털 항원을 이용하여 피부단자검사와 특이 IgE를 측정하였고 고양이털 항뭔에 대한 특이 IgE가 검출된 환자 16명과양성 대조군 1명, 음성 대조군 3명에서 SDS-PAGE후 Western blotting으로 IgE Imrnunoblot의 반응 양상을 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다.

1. 387례에서 시행한 Torii 사의 고양이털 항원에 대한 피부단자시험 양성율은 77례로 19,9% 이었고 이중 3+이상의 강양성은 30례로 7.8% 이었다.

2. 호흡기 알레르기(천식,비염) 환자중, 연령군에 대한 고양이털 항원의 양성도는 0세∼30세군이 37.9%, 30세-50세군이 16.5%, 50세 이상군에서 6.6%로 연령이 증가함에 따라 양성율이 감소함을 알 수 있었고 집먼지진드기와 잡초 꽃가루 항원에 대한 감작율도 같은

양상을 보였다.

3, Torii 사의 고양이털 항원에 대한 양성반응 환자군의 60%에서 고양이 상피에 대한 특이 IgE가 검출되었고 이는 통계적 의의는 없었으나 피부시험 양성도가 높을 수륵 특이 IgE가 높게 검출되었으며 Bencard 사의 고양이털 항원에 대한 피부 반응과 특이 IgE와는

피부시험 양성도가 높을 수록 특이 IgE가 높게 검출됨을 알 수 있었다.

4, 89례에서 시행한 자가 고양이털 항원에 대한 피부반응의 정도는 1+5.7%, 2+ 2.3%, 3+ 2.3%, 4+ 2.3%이었으며, 기관지 천식 56예중 1+ 4례(7.0%), 2+, 3+, 4+가 각각 2례로 3.5%의 양성율을 보였다. 이들 기관지 천식환자에서, Bencard 사의 항원을 이용한 피부시험에는 1+ 10.7%, 2+ 10.7%,3+ 1.8%, 4+ 1.8%의 양성율을 보였고, Torii 사의 항원을 이용한 경우 1+7.0%, 2+ 3.5%, 3+ 5.3%의 양성율을 보였다

5. 자가 고양이털 항원으로 ELISA방법을 이용하여 혈청내 특이 lgE를 측정 하였을때 기관지 천식 6례, 천식과 비염환자 1례의 7.53%(7/93)에서 검출되었으나 피부시험 결파와는 상관성이 없었다.

6. 고양이털 항원에 대한 특이 IgE가 검출된 환자의 혈청을 이용하여 IgE Immunoblotting을 시행한 바, 분자량 21∼94 KD(kilodalton)의 6개의 반응 단백띠를 관찰할 수 있었고 31.3%(5/16)에서 주요 항원인 Fel d 1으로 사료되는 21KD에 반응 단백띠를 관찰할 수 있었다 또한 3M FAST-plus 검사상 양성인 환자의 경우 주로 고분자량의 반웅 단백띠가 관찰되었으나 Cat ELISA법에 의해 특이 IgE가 검출된 환자의 경우에는 저분자량의 단백띠가

관찰되었다.

이상의 결과로 고양이털 및 상피는 우리나라에서 주요한 원인 항원의 하나로 간주되어야 하며 그 항원성 띤 면역학적 측면에서 더 많은 연구가 추가되어야 할것으로 생각된다.

Allergenic characterization of cat fur extract and it's skin sensitivities in

atopic diseases

Sun Young Rha

Department of Medical Science, The Graduate School Yonsei University

(Directed by Professor Chein Soo Hong)

To evaluate the clinical importance of cat fur as a causative allergen in

allergic diseases, skin prick tests with cat allergen of Torii company(Japan) were

performed in 387 patients and specific IgE was determined by ELISA method. Out of

387 patients, 77(19.9%) showed more than + results on skin prick test. There were

no significant differences in the rates of positive results according to the

allergic diseases, but the age groups were correlated with the positive

results.(younger than 30 : 34.5%, between 30 and 50 : 14.4%, older than 50 :6.8%)

I developed Cat ELISA with home-made cat fur allergen. The system showed specific

inhibition to cat fur allergen and Cat ELISA inhibition test revealed the linear

dose response curve on the added amounts of cat allergen into pooled sera. 67,7%

out of Torii cat fur sensitive patients (A/H ratio≥ 1) showed positive results in

Cat ELISA for specific IgE antibody.

Moreover, to characterize the allergenic components, cat fur extract were

fractionated by 12% sodium dodecyl sulfate Polyacrylamide gel electrophoresis

(SDS-PAGE), and 15 protein bands were detected. After they were transferred onto

nitrocellulose membrane and probed with sera of 16 cat-fur sensitive patients, one

sera pool of patients with RAST class 3, and three negative controls and with

biotin-conjugated anti IgE-avidin peroxidase, six IgE binding protein bands were

detected at 94,73, 56, 44, 28 and 21 kilodalton of molecular weight. Out of six IgE

binding bands, MW 21KD concerned as major cat allergen, fel d 1, were noted in five

sera(31,3%),

It is suggested that cat fur can be regarded as an important allergenic fur and

that we need further studies to standardize cat antigens for in vivo and in vitro

tests.

[영문]

To evaluate the clinical importance of cat fur as a causative allergen in allergic diseases, skin prick tests with cat allergen of Torii company(Japan) were performed in 387 patients and specific IgE was determined by ELISA method. Out of 387 patients, 77(19.9%) showed more than + results on skin prick test. There were no significant differences in the rates of positive results according to the allergic diseases, but the age groups were correlated with the positive results.(younger than 30 : 34.5%, between 30 and 50 : 14.4%, older than 50 :6.8%)

I developed Cat ELISA with home-made cat fur allergen. The system showed specific inhibition to cat fur allergen and Cat ELISA inhibition test revealed the linear dose response curve on the added amounts of cat allergen into pooled sera. 67,7%

out of Torii cat fur sensitive patients (A/H ratio≥ 1) showed positive results in Cat ELISA for specific IgE antibody.

Moreover, to characterize the allergenic components, cat fur extract were fractionated by 12% sodium dodecyl sulfate Polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), and 15 protein bands were detected. After they were transferred onto

nitrocellulose membrane and probed with sera of 16 cat-fur sensitive patients, one sera pool of patients with RAST class 3, and three negative controls and with biotin-conjugated anti IgE-avidin peroxidase, six IgE binding protein bands were detected at 94,73, 56, 44, 28 and 21 kilodalton of molecular weight. Out of six IgE binding bands, MW 21KD concerned as major cat allergen, fel d 1, were noted in five sera(31,3%),

It is suggested that cat fur can be regarded as an important allergenic fur and that we need further studies to standardize cat antigens for in vivo and in vitro tests.