PBMC를 분리하는 3가지 방식에 대한 성능 및 사용성 비교평가 연구

Abstract

현대의 진단검사의학은 첨단 의학 기술의 발달로 발병하지 않은 질병을 조기 예방하기 위한 면역진단검사에서 나아가 분자진단 검사를 통해 생애 동안 발생할 가능성이 있는 유전 질병까지 진단할 수 있게 되었다. 특히 진단면역과 유전학분야는 2019년 12월 발생하여 2023년 현재까지도 전 인류에게 고통을 주고 있는 Covid-19와 최신 의료기술의 발달에 따른 유전자 검사 비용의 획기적인 감소로 인해 관심이 어느 때보다 높은 상황이다. PBMC는 채취 후 수년까지 안정적으로 샘플을 보존할 수 있는 장기 냉동 보존(Cryopreservation)에 적합하기 때문에 이러한 진단면역연구에 선호되는 샘플의 유형으로, 면역학, 감염성 질환, 혈액학적 종양, 백신 개발, 이식 면역학 등 임상 연구에서 널리 사용되고 있는 검체이다. 의료현장에서 널리 쓰이고 PBMC 분리 프로토콜에는 크게 비중액, 고비중 Gel, 필터를 이용한 방식 3가지 다른 방식이 있다. PBMC의 분리 방식은 분리되는 Cell의 양과 질에 다양한 영향을 끼칠수 있으므로 본 연구의 결과를 통해 후속 연구 또는 사용자의 연구환경에 따라 적합한 PBMC 분리 프로토콜을 결정하는데 도움이 되기를 기대한다. Modern diagnostic laboratory medicine has been developed from preventing diseases that have not occurred at an early stage through immunodiagnostic technology to diagnose genetic diseases that may occur throughout their lives with molecular diagnostic tests. In particular, interest in the fields of immunodiagnosis and genetic diagnosis is higher than ever due to Covid-19, which broke out in December 2019 and is still causing suffering to all mankind as of 2023, and the dramatic reduction in genetic testing costs due to the development of the latest medical technology. Since PBMCs is suitable sample for long-term cryopreservation that can stably preserve samples for several years after collection, it is a preferred sample type for immunodiagnosis research, and widely used in clinical studies of immunology, infectious diseases, vaccine development, and transplantation immunology. There are three different PBMC separation protocols that are widely used in medical filed: Manual separation method with specific gravity medium, Separation method using separation gel, and filter-based separation methods. Since the separation method of PBMC can have various effects on the quantity and quality of separated cells, the results of this study can help determine an appropriate PBMC separation protocol according to follow-up research or the user's research environment.