국내 RhD 음성 헌혈자에서의 DEL형의 Rh-Hr 표현형 및 유전자형 분석

Abstract

RhD 항원은 ABO 항원 다음으로 면역원성이 강한 항원으로, 생성된 anti-D 는 심각한 용혈성수혈반응 또는 태아신생아용혈성 질환을 일으킬 수 있다. 약 D형 중 극소량의 D항원을 가지고 있는 DEL 항원은 과거에는 RhD 음성 환자에게 수혈되어도 anti-D가 생성되지 않는다고 알려져 왔으나, 최근 RhD 음성 환자에게 DEL형의 혈액제제가 수혈된 후 anti-D 가 생성된 사례들이 보고되고 있다.

본 연구에서는 본원으로 공급되는 RhD 음성 농축적혈구제제에서 DEL형의 빈도, 표현형 및 DEL형의 대립유전자를 분석하기 위해 흡착-용출 시험과 RHD 유전자의 exon 4, exon 7, exon 10, promoter 부위에 대한 multiplex polymerase chain reaction (PCR) 검사, Multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) 및 RHD 유전자 exon 9 부위의 직접염기서열 분석을 시행하였다.

RhD 음성혈액 100검체 중multiplex PCR과 MLPA 검사 결과 78건이 RHD 유전자 동형접합체 결손을 보였고, 4건이 RHD-CE-D 하이브리드 형성, 18건이 유전자 이형접합체 결손을 보였다. 유전자 이형접합체 결손을 보인 18건은 흡착용출 시험에서 DEL 형으로 확인되었고, MLPA 검사와RHD 유전자exon 9의 직접염기서열 분석을 한 결과 18건 모두에서 ‘Asian DEL type’인RHD (K409K, 1227G>A) 변이가 확인되었다. 또한, DEL 형의 RhCcEe 표현형을 분석한 결과 18건 중 Ccee가 14건 (77.8%), CcEe가 4건 (22.2%) 으로 18건 모두 C 항원이 표현되었다.

RhD 음성혈액의 안전한 수혈을 위하여 RhD 음성혈액으로 공급되는 혈액제제의 RHD 유전자 검사를 통해 순수한 D 음성 혈액과 DEL 형을 구분하는 새로운 수혈검사 체계의 도입이 필요하다.