자유생활아메바 Naegleria fowleri의 계대감염에 의한 병원성의 변화에 관한 연구

Abstract

[한글]

자유생활아메바의 병원성은 주(株), 배양조건, 숙주의 연령이나 면역상태에 따라 다르며(Wong et al., 1975), 감염시키는 방법이나 실험동물에 따라 다르다고 보고되고 있다(Butt et al., 1968; Culbertson et al., 1968; Carter, 1970). 황등(1976)은 자연환경에서

분리 배양한 자유생활아메바 Acanthamoeba sp.를 마우스 비강점막을 통해 감염시켜 실험적 뇌수막염이 발생함을 관찰하였다. Phillips(1973)은 이질아메바를 시험관내에 장기간 무균적으로 배양하면 병원성이 약화된다고 보고하였다. 오랜기간 시험관내에서 무균적으로 배양하여 병원성이 약화된 자유생활아메바 Naegleria fowleri를 마우스에 연속적으로 감염시켜 그 병원성의 증감 여부를 관찰하고자 하였다.

Naegleria fowleri 0주는 시험관내에서 7년이상 CGVS 배지에서 배양한 것이고, 2-1주는 0주를 마우스에 감염시킨 후 뇌조직에서 분리하여 20일 배양시킨 뒤, 그것을 다시 마우스에 감염시킨 후 마우스의 뇌조직에서 분리하여 15주 배양한 것이다.

사용된 마우스는 백색마우스로 체중은 18∼22gm이었고 각 실험군 별로 숫컷 20마리씩 사용하였다. secobarbital을 마우스 체중 gm당 0.055mg을 복강내로 주입하여 마취시킨 후 Naegleria fowleri 영양형 부유액 5㎕당 10x10**4 마리씩 함유되게 만들어 마우스의 오른쪽 비강내에 떨어뜨려 감염시켰다.

행동둔화, 자극에 대한 예민성, 회전운동, 사지마비등 여러 증상이 나타났고, 0주 감염군보다 2-1주 감염군에서 보다 빨리, 보다 심하게, 많은 수에서 나타났다. 뇌 오른쪽 앞쪽 부위에 심한 염증 및 괴사를 발견할 수 있었고 이러한 병소는 모두 뇌의 오른쪽에 발생되었음을 알 수 있었다. 또한 병소는 2-1주 감염군에서 0주 감염군보다 광범위하게 발생되었다. 감염 7일후부터 감염된 마우스가 사망하기 시작하였으며 2-1주 감염군에서 0주 감염군보다 생존기간이 짧았으며, 13일후부터 사망한 예에 있어서는 육안적으로 뇌에서 염증이나 괴사부위를 관찰할 수 없었고, 폐장에서 염증이 심하였음을 관찰할 수 있었다.

마우스 오른쪽 비강에 배양된 Naegleria fowleri 영양형을 떨어뜨려 감염시킴으로써 전형적인 원발성 아메바성 뇌수막염을 발생시킬 수 있었다. 장기간 시험관내에서 무균적으로 계대 배양된 Naegleria fowleri는 병원성이 약화되어 있었음을 알 수 있었고, 이 아메바를 마우스에 연속적으로 감염시켜 뇌조직을 통과시킴으로 다시 병원성이 증강됨을 관찰하였다.

[영문]

The pathogenicity of free-living amoeba, Naegleria fowleri, is influenced according to the strain, cultural condition and host (Culbertson et al., 1968; Carter, 1970; wong et al., 1975).

Phillips (1973) demonstrated that Entamoeba histolytica became avirulent after more than 2 year maintenance in axenic culture in vitro. This study was carried out to compare the difference in pathogenicity between two strains of N. fowleri, one of a prolonged maintenance in axenic medium and one of obtained by serial brain passage in mice.

The 0 strain was that N. fowleri had cultivated axenically more than 7 years in CGVS medium. The 2-1 strain was obtained from the brain of mouse inoculated intranasally with a strain, which was from the mose brain infected with 0 strain, and cultured for 15 weeks until the beginning of this experiment.

White male mice weighing 18-22 gm were used. Mice were anesthetized by an intraperitoneal injection of about 1 mg secobarbital, and inoculated intranasally with 10 x 10**4 live N. fowleri trophozoites in a 5 ㎕ cell suspension.

Sluggish behaviour, nervousness, rotation and leg paralysis were developed early and frequently in the 2-1 experimental group more than the control0 group.

Pathological changes such as inflammatory and necrotic lesion were observed in the olfactory and anterior portion of brain, and these changes were more extensive in the lung were demonstrated in mice died after 13th day post-inoculation. The experimental mice of 2-1 group began to die suddenly from 7th day post-inoculation, and survival time in 2-1 group mice was shorter than 0 group mice.

The typical primary amoebic meningoencephalitis was developed in the mice inoculated intranssally with N. fowleri. The prolonged maintenance of N. fowleri amoebae in axenic CGVS medium were observed to have lost their original pathogenicity for mice, but their pathogenicity was restored by serial brain passage in mice.