말초혈액 과립백혈구에 대한 TNF-a와 IL-1의 시험관내 화학주성능에 관한 연구

Abstract

[한글]

혈중 호중구가 손상조직으로 이동하는 기전에 관한 연구가 활발해 지면서 LPS에 의해 유발된 급성염증반응기전에 관한 많은 사실이 알려지게 되었다. LPS는 화학주성능이 없음에도 불구하고 생체내에서 혈중호중구의 급격한 이동을 유발시키는 것으로 알려져 있다.

이러한 현상은 IL-1이나 TNF등에의해 매개되는 것으로 밝혀지고 있다. 그러나 IL-1과 TNF의 시험관내 화학주성능에 대해서는 아직 상반된 의견이 보고되고 있다. 한편 LPS, IL-1, 그리고 TNF등은 혈중 단핵구로부터 새로운 화학주성인자를 유도시키는 것으로 보고되고 있다. 또한 TNF는 과립백혈구의 화학주성능을 억제하는 것으로 알려지고 있다.

본 연구에서는 IL-1과 TNF의 시험관내 화학주성능을 측정하여본 결과 IL-1이 화학주성능을 나타내지 않는다는 것을 관찰할 수 있었으며 TNF는 화학주성능을 나타내기는 하나 그 능력이 매우 미약함을 알 수 있었다. 그리고 LPS와 TNF로 각각 말초혈액 단핵구를 자극하여 얻은 세포배양 상층액에서 의의있는 화학주성능을 관찰할 수 이었다. 그러나 IL-1으로 자극한 경우에는 의의있는 화학주성능을 관찰할 수 없었다. LPS, IL-1, 그리고 TNF로 과립백혈구를 자극하면 TNF로 자극한 경우에 의의있는 화학주성능의 감소가 관찰되었다.

이상의 결과로부터 LPS에 의한 급성염증반응에서 과립백혈구의 이동은 IL-1이나 TNF의 직접적인 화학주성능에의한 것이라기 보다는 LPS와 TNF가 단핵구를 자극하여 화학주성능를 분비하도록 함으로써 일어날 것으로 추측할 수 있었다. 또한 TNF가 과립백혈구의 FMLP

에 대한 화학주성능을 억제하는 현상은 TNF가 과립백혈구의 FMLP 수용체에 영향을 미침으로써 염증반응에 관여할 것으로 생각할 수 있었다.

[영문]

In vitro chemotactic activities of peripheral blood polymorphonuclear leukocyte(PMN) to the TNF-α and IL-1 were studied by examining migration distance with under agarose method. The chemotactic activities of peripheral blood mononuclear cell(PBMC) culture supernatant with TNF, IL-1, and LPS were also examined. After PMN stimulation with TNF, IL-1, and LPS, the chemotactic activities of PMN to FMLP was examined. In this tests the following results were obtained.

1. The optimal conditions of chemotactic activity of PMN to FMLP in the under agarose method were concentration of 10**-7 M and 2 hours of incubation time.

2. IL-1 has no in vitro chemotactic activity to PMN. TNF has chemotactic activity at 1x10**5 U/ml and 1x10**4 U/ml. But each chemotactic activities of TNF were only 12.2% and 18.9% to FMLP 10**-7 M.

3. The chemotactic activities of PBMC culture supernatant, which stimulated with IL-1, TNF, and LPS, were examined. The culture supernatant stimulated with TNF has chemotactic activitiy at 200 U/ml concentration only.

But The culture supernatnat stimulated with IL-1 has no chemotactic activity at any examined concentrations. The case of LPS has chemotactic activity at every examined concentrations.

4. The direct effects of IL-1, TNF, and LPS to chemotactic activity of PMN were examined. TNF inhibits the chemotactic activity of PMN. But IL-1 and LPS has no effect to the chemotactic activity of PMN.

In this result, therefor, the acute inflammation induced by LPS was not the result of direct chemotactic activities of IL-1 and TNF but of other chemotactic induced by TNF or LPS from PBMC. And the inhibition of PMN chemotactic activity by TNF may contribute to inflammation response by modulating the FMLP receptor of PMN.