위암, 대장암 및 간암 세포주에서 p16INK4A 단백 발현

Abstract

[한글]

암세포에서 정상적인 증식 조절 기전의 손상은 기본적이고 필수적인 변화이며, 세포 식 과정 중 G^^1 기에서 S기로 이행되는 과정에 관여하는 인자들이 발암과정에서 중요한 역할을 한다고 생각되고 있다. 세포주기 진행을 억제하는 p16**INK4A 단백을 만드는 p16**INAK 유전자는 흑색종(melanoma)이나 성상세포종(astrocytoma)과 같은 특정 세포주에서 동형 접합체 결손(homozygous deletion)의 빈도가 높아 종양 억제 유전자로서 가능성이 제시되어 많은 연구가 진행되고 있다. 그러나 우리나라에서 발생 빈도가 높은 위암, 대장암 그리고 간암에서의 p16**INK4A 유전자 결손이나 단백 발현 이상에 관한 연구는 많지 않고, 특히 우리나라 환자로부터 얻은 세포주에 대한 연구는 미미한 실정이다.

본 연구는 p16**INK4A 유전자 결손과 p16**INK4A 단백 발현 이상을 알아보고자 우리나라의 암환자로부터 수립된 위암 세포주(SNU-1, SNU-5, SNU-16), 대장암 세포주(SNU-C1, SNU-C2A, SNU-C4, SNU-C5), 간암 세포주(SNU-182, SNU-387, SNU-398, SNU-449, SNU-475)와 일본의 암환자로부터 수립된 위암 세포주(MKN-45)를 대상으로 중합 효소 연쇄 반응으로 p16**INK4A 유전자를 검출하고 Western blotting으로 p16**INK4A 단백 발현을 조사하였다

p16**INK4A 유전자는 위암 세포주 SNU-16을 제외한 12개의 세포주에서 검출되어 위암, 대장암 그리고 간암 세포주에서 유전자 동형 접합체 결손율이 매우 낮았다. 그리고 p16**INK4A 단백은 위암 세포주 MKN-45,대장암 세포주 SNU-Cl, 간암 세포주 SNU-182를 제외한 다른 세포주에서는 검출되지 않아 p16**INK4A 단백 발현 이상율은 높게 나타났다 (77%, 10/13).

이런 결과로 보아 위암, 대장암 및 간암의 종양화 과정에서 p16**INK4A 유전자 결손과 함께 p16**INK4A 단백 발현의 이상도 중요한 역할을 할 것으로 생각되며 앞으로 p16**INK4A 유전자 불활성화(gene inactivation) 과정에 대한 연구가 필요하다고 생각된다.

[영문]

In the oncogenesis, the genetic alterations involve the positive regulators(oncogenes) as well as the negative regulators(tumor suppressor genes). The p16**INK4A protein is a specific inhibitor of cdk4 which is one of the kinases regulating cell cycle. The p16**INK4A gene located on human chromosome 9p21 is commonly deleted in many cancer cell lines. The homozygous deletions or the mutations of the p16**INK4A gene are frequently detected in melanomas and non-small cell lung cancers.

In this study, the homozygous deletion of p16**INK4A gene and the alteration of p16**INK4A protein expression in the stomach cancer, colon cancer and hematoma cell lines were examined by PCR and Western blotting respectively. The p16**INK4A gene was detected in 12 of 13 examined cancer cell lines. The p16**INK4A protein could be detected in only 3 of 13 cancer cell lines. In these results, the homozygous deletion of p16**INK4A gene occurred infrequently, while the alteration of p16**INK4A protein expression was common.

Therefore, it may be suggested that the altered p16**INK4A expression as well as the p16**INK4A gene deletion plays an important role in oncogenesis of the stomach cancer, the colon cancer, and the hepatoma. Further studies to investigate the

mechanism of p16**INK4A gene inactivation are expected.