Gutta-percha cone의 수종의 소독제 처리에 따른 멸균 효과 및 소독제 처리 후 표면 및 물성 변화 비교

Abstract

[한글]

이번 연구는 진료실에서 사용되고 있는 gutta-percha cone에 어떤 종류의 세균이 오염되었는지 동정한 후 이들 세균의 소독에 효과적인 소독제를 찾고 소독과정에 따른 gutta-percha cone 표면 및 물성변화를 비교 평가하기 위한 것이다.진료실에 비치된 gutta-percha cone 150개를 수집하여 200 ㎕ PBS 완충용액에 vortexing 처리한 후 BHI 평판배지에 도말하여 cone의 오염도를 측정하고 그 때 나타난 균을 universal primer를 이용한 중합효소연쇄반응법 (polymerase chain reaction, PCR)을 이용해 동정하였다. 이들 세균에 오염된 gutta-percha cone을 5.25% NaOCl, 2% chlorhexidine, 75% isopropyl alcohol, 2% chlorhexidine과 75% isopropyl alcohol 혼합액으로 1분, 5분, 30분, 60분간 소독처리하여 BHI 액체배지의 혼탁도와 계대배양으로 멸균효과를 평가하였다. 또한 이들 소독제로 5분동안 소독처리한 후 cone 표면의 변화를 주사전자현미경 (scanning electron microscopy, SEM)을 통해 확인하고, 마지막으로 cone의 소독처리 후 물성의 변화, 특히 인장강도와 연신률을 Instron을 이용해 측정, 비교 분석하였다.결과는 다음과 같다.1. 진료실에 비치된 gutta-percha cone 150개 중 19.3% 에서 균이 발견되었으며, PCR을 이용한 균 동정 결과, 모두 Staphylococcus 계통의 균으로 밝혀졌다.2. 동정한 균을 오염시킨 cone에 5.25% NaOCl, 2% chlorhexidine, 75% isopropyl alcohol, 2% chlorhexidine과 75% isopropyl alcohol 혼합액으로 소독한 결과 1 분만에 모두 멸균되는 효과를 보였다.3. 5 분간 소독제 처리 후 주사전자현미경 통해 표면을 관찰한 결과 다른 소독제는 표면의 수축 정도만 나타난 반면, 5.25% NaOCl은 cuboidal crystal이 표면에 부착되어 있었으며 cone의 구성성분도 일부 유리되는 양상이 관찰되었다.4. 소독제 처리 후 gutta-percha cone의 물성변화를 평가한 결과 인장강도는 NaOCl과 증류수에 담근 cone이 소독 처리하지 않은 대조군에 비해 증가하였고 (p < 0.05), 연신률에서는 모든 군에서 소독 처리하지 않은 대조군보다 유의하게 증가하였다 (p < 0.05 ).결론적으로 진료실에 노출된 gutta-percha cone에 오염된 Staphylococcus 균은 임상에서 사용하는 다양한 종류의 소독제를 통해서도 단시간에 멸균 가능함을 알 수 있었다. 다만 소독처리과정에 나타나는 cone의 형태적 물리적 변화가 장기적으로 근관치료 예후에 어떠한 영향을 미치는지에 대해서는 추가적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.

[영문]ObjectivesThe purposes of this study were firstly to identify the microbial species on gutta-percha cones exposured at the outpatient clinic using PCR (Polymerase chain reaction), and secondly to evaluate the sterilization effect of four antiseptic solutions. It also evaluated the changes of surface texture and the physical properties of gutta-percha cones after 5-min soaking in four antiseptic solutions.Ⅱ. Materials and Methods150 gutta-percha cones from outpatient clinic were randomly selected for microbial detection using PCR assay with universal primer. After inoculation on the sterilized GP cones with the same microorganism identified by PCR assay, all GP cones were soaked in 4 different antiseptic solutions (5% NaOCl, 75% isopropyl alcohol, 2% Chlorhexidine, and the mixture of 75% isopropyl alcohol and 2% Chlorhexidine) for 1, 5, 30, and 60 minutes. The sterilization effect of the antiseptic solutions and the change of surface textures were evaluated using a scanning electron microscope (SEM). The tensile strength and elongation rate of the GP cones were also measured using an Instron 5500 set at 1.5 mm/min cross-head speed before and after 5 min-soaking in the antiseptic solutions. Statistical analysis was performed.Ⅲ. Results1. 29 of 150 cones were contaminated (19.3%) and mainly with Staphylococcus .2. All antiseptic agents were effective in sterilization with just 1 minute soaking.3. On the SEM pictures of the 5% NaOCl-soaked group, a cluster of sodium-chlorite crystals on the surface of GP cone was shown.4. The tensile strength of 5% NaOCl-soaked cone was significantly larger (p<0.05), and the elongation rate was larger in all antiseptic solution groups compared to fresh GP cone (p<0.05).Ⅳ. ConclusionOur present data demonstrate that all antiseptic solutions are useful for rapid-sterilization of gutta-percha cone before obturation. Further research on the rapid-sterilization technique, however, should be conducted to determine the clinical relevance of the changes of physical properties on gutta-percha cone.