구강에서 분리한 candida albcans의 phospholipase 활성 및 세포화학적 활성위치에 대한 전자현미경적 연구

Abstract

[한글]

Phospholipid를 분해하는 효소인 phospholipase는 모든 생물세포의 세포막과 소포주위에서 주로 발견되며, 특히 세포막의 구조와 기능에 중요하다.

Candida albicans 중 phospholipase를 생성하는 균주는 병원성과 관련이 있으며, phospholipase 활성은 균주가 숙주세포에 침습하는데 중요한 역할을 한다고 알려져 있다.

이에 저자는 C. albicans의 phospholipase 생성능과 병원성과의 관계를 좀더 규명코져 구강에서 채취, 분리한 Candida속에 대한 분포 및 phospholipase의 생성여부와 C.albicans의 phospholipase생성능과, phospholipase 생성균주와 비생성균주 간의 병원성관계 및 phospholipase 생성균주의 실험실내 환경조건에 따른 생성능 변화를 연구하였으며, 아울러 전자현미경을 통하여 phospholipase의 활성위치를 관찰하여 다음과 같은 결론을 얻었다.

1. Candida속으로 동정된 42주 중 C.albicans가 36주(85.6%)로 가장 많았으며, C.parapsilosis 와 C. tropicalis 가 각각 2주·(4.8%)씩, C.krusei 와 C.veronae 가 각각 1주(2.4%)씩 이었다.

2. Candida속 42주에 대한 평판배지법과 적정법에 의한 phospholipase 생성균주는 32주와 35주이었으며, 평판배지법에 의한 32주는 모두 C. albicans 이었고, 침전대값(P^^z 값)은 평균 0.65 ± 0.19이었으며, 적정법에 의한 35주중, 34주는 C.albicans이었으며 1주

는 C. parapsilosis 로서 평균값은 6.09 ± 3.38 lU/L 이었고. 두 방법간의 차이는 없었다(X^^2-test 값 0.916:자유도1 ).

3. 계대배양에 따른 phospholipase 생성능은 균주 간의 차이는 있으나 전체적으로 감소상을 보였다.

4. 배지내 난황농도에 따른 phospholipase 생성능은 전반적으로 농도가 낮은 (3.0%) 경우가 농도가 높은(12.0%)경우보다 높았으며, 난황농도가 7.0∼8.0%에서 가장 안정된 변화를 보였다.

5. 배지내 pH변화에 따른 phospholipase 생성능은 pH가 3.0일때 가장 높은 생 성능을 나타내었으며, pH 8.0에서 생성능의 소실을 나타내기 시작하여 pH9.0에서는 모든 균주가 생성능을 상실하였다.

6. C. albicans의 phospholipase 생성능이 높은 균주(P**z=0.37), 낮은 균주(P**z=0.70), 비생성균주(P**z=1,00)간의 생쥐에 대한 LD^^50(lethal dose50)은 생성능이 높은 균주에서 6.0x10^^4 cells/㎖, 낮은 균주 3.0x10^^5cells/㎖, 배생성균주 3.7x10^^5 cells/㎖로 phospholipase 생성능이 높은 균주가 높은 병원성을 나타내었다.

7. 전자현미경적 관찰에서 phospholipase 생성 C. albicans의 phospholipase 활성위치는 세포막과 세포벽이었다.

[영문]

Phospholipase have been found in many fungi and it has been suggested that they play a role in pathogenicity.

In this study the author has investigated and measured the amount of phospholipase activity in Candida species and attempted a correlation between the phospholipase positive strains and the phospholipase negative strains in pathogenicity.

The author also observed the cytochemical localization of phospholipase in Candida albicans.

The results were as follows;

1. The identified 42 Candida species were C. albicans (36), C. parapsilosis (2), C. tropicalis (2), C. Krusei (1) and C. veronae (1).

2. Among the 42 strains of Candida species, 32(76.2%) were phospholipase positive with a mean Pz value of 0.65±0.19 by plate method, whereas 35(83.3%) were positive with a mean value of 6.09±3.38 IU/L by titrimetric method. All of the phospholipase positive strains were C. albicans in plate method, whereas only one strain was not C. albicans but C. parapsilosis in titrimetric method.

3. Generally, continuous subculture of the phospholipase positive strains on Sabouraud's dextrose agar and phospholipase producing medium reduced the phospholipase activities.

4. Generally, the phospholipase activities increased in low concentration (3.0%) of egg yolk compared with high concentration (12%) of egg yolk in medium but the phospholipase activity showed most stable difference in 7%∼8% concentration of egg yolk.

5. The phospholipase positive strains had the higest phospholipase activities at pH 3.0 on medium whereas non of the strains were positive at pH 9.0.

6. The LD**50 (lethal dose 50) of the high phospholipase activity strains (Pz=0.37), low activity strains (Pz=0.70) and nagative strains (Pz=1.00) were 6.0 x 10^^4 cells/ml, 3.6 x 10^^5 cells/ml, 3.7 x 10^^5 cells/ml in mice.

The C. albicans strains which were most pathogenic in mice had the highest phospholipase activity.

7. In the electron microscopic findings, the phospholipase in C. albicans were localized at the cell membrance and cell wall. Most of the phospholipase activity appeared to originate in the cell membrane.