이질아메바의 효소양상(isoenzyme pattern)과 병원성에 관한 연구

Abstract

[영문]

[한글]

오래전 부터 인체의 기생원충인 이질아메바(Entamoeba histolytica)의 병원성에 대한

문제가 논의되어 왔다.

이질아메바의 씨스트의 크기에 따라 그 병원성이 다르다는 보고도 있으며 (Frye and Me

leney, 1937; 임 등 1965), 이 (1969)는 아메바성 간농양 환자, 장아메바증 환자 및 무증

상 씨스트 배출자들로 부터 씨스트를 분리배양하고 동물에 실험적으로 접종했을 때 무증

상 씨스트 배출자에서 분리된 씨스트가 병원성이 약함을 보고한 바 있다. 또한 근래에 Sa

rgeaunt등(1978)이 침습성(invasive) 및 비침습성 (non-invasive) 아메바 주(株)를 분리

배양하여 그들의 효소를 전기영동하고 각각 효소의 주행양상을 관찰하여 병원성을 구분한

바 있다.

본 연구에서는 아메바의 주에 따른 병원성을 알아보고자 장아메바증 환자, 아메바성 간

농양 환자 및 무증상 씨스트배출자로 부터 아메바를 분리하여 Robinson배지 (Robinson, 1

968), diphasic 배지 (Faust and Russel, 1964) 또는 TPS-1배지 (Diamond, 1968)에 배양

하고, 항원(또는 용출액, lysate)을 만들어 starch-gel electrophoresis를 시행하여 phos

phoglucose isomerase(E. C. 5. 3. 1. 9; PGI), phosphoglucomutase(E. C. 2. 7. 5. 1: P

GM), malic enzyme(E. C. 1. 1. 1. 40; ME) 그리고 hexokinase(E. C. 2. 7. 1. 1; HK)의

주행양상을 관찰하였다. 또한 병원성과의 상관성을 알아보기 위해 각기 분리배양된 아메

바 주를 백서의 맹장(cecum)에 주입하고 1주 후에 희생시켜 맹장의 변화를 관찰하여 아래

와 같은 결과를 얻었다.

1. PGI는 HK-9, KY-15, 27, 37, 43 및 53의 6개 주에서 1∼2개의 염색대로 관찰되었다.

2. PGM은 HK-9, KY-15, 44, 45 및 53에서 1∼2개의 염색대로 관찰되었다.

3. HK 나 ME는 모두 같은 isoenzyme 양상을 보였다.

4. 4가지 효소의 양상을 종합했을때 간농양즙, 설사를 자주 호소하는 환자의 대변, 무

증상씨스트 배출자의 대변 및 급성 장아메바증 환자의 대변에서 분리된 것들은 서로 구분

되었다.

5. 백서에 대한 병원성 실험결과 아메바는 검출되나 뚜렷한 병변은 관찰되지 않았다.

이상의 결과로 보아 백서에 대한 병원성은 확실치 않으나, isoenzyme 특히 PGM 및 HK

양상은 아메바의 병원성에 따라 다를 것으로 생각된다.

Electrophoretic Isoenzyme Patterns of Entamoeba histolytica in Korea

Tae-Wook Kim

Department of Medical Science The Graduate School, Yonsei University

(Directed by Prof. Chin-Thack Soh,M.D. and Assistant Prof. Duk-Young Min, M.D.)

The pathogenicity or virulence of Entamoeba histolytica has been studied by a

number of researchers and clinicians since its discovery by Losch(1875). Those were

by size(Frye and Meleney, 1937; Lim et al., 1965), clinical manifestations(Lee,

1969) or cytochemical characters(Reeves and Bischoff, 1968).

Recently Sargeaunt and his collegues(1978, 1979, 1980 a, b) reported that

electrophoretic isoenzyme patterns of Entamoeba histolytica might contribute to

distinguish the pathogenic strain from the non-pathogenic.

The present study was carried out to confirm the theory of Sargeaunt and to

elucidate the distribution of virulent strain in Korea.

The samples were collected from amoebic colitis patients, amoebic liver abacess

cases, or asymptomatic cyst passers from various part of Korea, and cultured for

isoenzyme studies.

Starch-gel electrophoresis for phosphoglucose isomerase(E.C.5.3.1.9; PGI),

phosphoglucomutase(E.C.2.7.5.1; PGM), malic enzyme(E.C.1.1.1.40; ME) and

hexokinase(E.C.2.7.1.1;HK) was done with the technique of Maazoun et al. (1981)

with small modifications, and rats were inoculated with each amoebal strains at

cecal region and then sacrificed 1 week after inoculation for the observation of

pathologcial changes on the cecal walls.

The results obtained are summarized as follows ;

1. PGI was demonstrated as single or double bands in HK-9, KY-15, 27, 37, 43 and

53.

2. PGM was demonatrated as single or double bands in HK-9, KY-15, 44, 45 and 53,

was suggested as pathogenic characteristic.

3. HK pattern showed double and ME pattern showed single band. These two

patterens characterize Entamoeba histolytica.

4. In the experimental inoculation of amoebae to rats, no clearcut pathological

change was observed in the cecum except one case, eventhough the amoebae were

recovered from intestinal contents of all the infected rats.

In conclusion, the overall results suggest that isoenzyme patterns epecially PGM

and HK of amoebal strain may contribute in identification of Entamoeba histolytica

from other intestinal amoebae and also identify the pathogenic strain of Entamoeba

histolytica from the non-pathogenic.