자가면역성 질환에서의 말초혈액 T임파구의 subpopulation에 관한 연구

Abstract

[영문]

[한글]

인체의 면역반응에 었어서는 항원물질의 본태에 따라 T임파구, B임파구, 그리고 거식세

포가 상호협동작용을 하며 그중에도 T임파구가 가장 중요한 역할을 한다(Reinherz 및 Sch

lossman, 1980a). T임파구는 helper와 suppressor T임파구로 대별하는데 이들은 각기 다

른 세포표면항원과 표면 marker를 가지고 있다(Evans등, 1978). 이러한 세포표면항원에

대해 백서에서 단일클론항체(monoclonal antibody)를 유발시켜 말초혈액 T임파구 subpopu

lation을 감별할 수 있다(Reinherz등, 1980b).

T임파구 subpopulation사이의 불균형은 인간에서 여러가지 질병을 유발할 수 있는데 특

히 자가면역성질환에서 suppressor T임파구의 변화가 많이 연구되고 있다(Morimoto, 1979

: Strelkauskas등, 1978: Inoshita등, 1981: 박등,1981).

그러나 자가면역성 질환에서의 연구는 대부분 T임파구가 갖는 Fc receptor를 이용한 것

이다. 이에 저자는 단일클론항체를 이용하여 전신성홍반낭창 환자와 Craves병 환자를 대

상으로 suppressor T임파구의 숫적 및 기능적 변화를 관찰하므로써 이들 질환의 병인을

규명할 지견을 얻고저 하였다. 또한 아울러 말초혈액 T임파구외 subpopulation 및 suppre

ssor cell removal index의 참고치를 설정하여 보기로 하였다.

실험재료로는 건강인 30명과 1982년 3월∼8월사이에 연세외료원에 내원한 전신성흥반낭

창 환자 7예 및 Graves병 환자 16예로부터 말초혈액을 채취하여 실험하였다.

임파구의 분리는 Ficoll-Hypaque방법을 사용하였고 non-T임파구로 부터의 T임파구의 분

리는 nylon-wool column을 이용한 Lowry등(1979)의 방법을 사용하였다. Helper 및 suppre

ssor T임파구검사는 Reinherz등(1987b)의 방법을 따라 간접 면역형광법을 이용하였다. Su

ppressor T임파구의 기능은 Aoki등(1979)의 방법에 의해 suppressor cell removal index

를 구하였다.

그 실험성적은 다음과 같다.

1. 건강성인(21∼39세) 30명을 대상으로 실험한 결과 helper 및 suppressor T임파구 백

분율은 각각 평균 61.3±6.5% 및 23.0±3.7%이었고 남여의 유의한 차이는 없었다(P>0.05)

.

2. 건강성인(22∼31세) 10명에서 실험한 결과 임파구유약화는 Con A 농도가 높아짐에

따라 점차 증가되었고, suppressor cell removal index는 Con A 농도 1.5㎍/ml일 때 가장

높아 2.3±1.1을 나타냈다.

3. Suppreasor T임파구 백분율과 Con A 농도 1.5 ㎍/ml일때 auppresaor cell removal i

ndex사이에는 특별한 상관관계가 없었다.

4. 전실성홍반낭창환자 7예중 치료를 받지 않은 2예에서 suppressor T임파구 백분율 및

Con A 농도 1.5㎍/ml일때외 suppressor cell removal index는 각각 17.0±1.4%와 0.8±0

.1이었고, 치료를 받은 5예에서는 각각 15.6±3.6%와 0.9±0.4로서 건강인에 비해 모두

유의한 감소를 보였으며(P<0.05) 치료에 따른 유의한 차이는 관찰되지 않았다.

5. Graves병 환자 16예중 갑상선기능이 항진될 12예에서 suppressor T임파구 백분율 및

Con A 농도 1.5㎍/ml 일 때의 suppressor cell removal index는 각각 19.1±4.5%와 0.8

±0.3이었고, 갑상선기능이 정상인 4예에서는 자각 17.5±3.9%와 1.0±0.2로서 건강인에

비해 유의한 감소를 보였으며(P<0.05) 갑상선기능과 suppresser T임파구 백분율 및 suppr

essor cell removal index사이에는 상관관계가 없었다.

6. 자가면역성질환 환자 10예(전신성홍반낭창 3예, Graves병 7예)를 대상으로 실험한

결과 임파구유약화는 Con A 농도 20㎍/ml에서 건강인에 비해 유의한 감소를 보였다(P<0.0

5). Suppressor cell removal index는 Con A 농도 1.5 ㎍/ml 일때 가장 감소되었다.

Studies on Subpopulation of Human Peripheral Blood T Lymphocytes in Auteimmune

Diseases

Yoon Chung Kim

Department of Medical Science The Graduate School, Yonsei University

(Directed by Prof. Samuel Y. Lee, M.D.)

Immune responses result from complex events invelving the interaetion of T and B

lymphocytes and macrophages. It has been shown that antigen triggers T lymphocytes

capable of helping, amplifying, or suppressing other T lymphocyte or B lymphocyte

responses(Reinterz and Schlossman, 1980b). More recent data support the notion that

T lymphocyte help and suppression ars mediated by different Fc receptors and cell

surface antigens(Evans et at., 1978). The ability to define T lymphocyte

subpopulation has helped to provide a better understanding of diseases associated

with autoimmunity(Morimoto, 1978; Strelkauskas et al., 1978; Inoshita et al., 1981;

Park et al., 1981).

The present investigation is to identify human T lymphocyte subpopulation using

monoclonal antibodies and to correlate in vitro functional properties of suppressor

T lymphocyte with in vivo disorders of the immune response. In addition, the anther

studied T lymphocyte subpopulation and suppressor cell removal index in normal

subjects for reference value in Korea.

Mononuclear cells from peripheral blood were isolated by Ficoll-Hypaque

technique. T Ilymphocytes were separated from non-T cells by nylon wool

column(Lowry et at., 1979). Helper and suppressor T lymphocytes were identified by

indirect immunofluorescence technique using monoclonal antibody(Reinherz et at.,

1980b). Suppressor T lymphocyte function was assessed hy short-lives supprressor

cell assay using suppressor cell removal index(Aoki et al., 1979).

The results are summarized as follows.

1. The mean percentage of helper and suppressor T lymphocytes from peripheral

blood in 30 normal subjects was 61.3±6.5% and 23.0±3.7%, respectively. There was

no statistically significant sexual difference.

2. In control subjects, blastogenesis of the preculture was enhanced at higher

concentrations of Con A. The suppressor cell removal index was maximal at a lower

concentration of Con A(1.5㎍/ml) with a mean value of 2.3±1.1 which is consistent

with the expected loass of suppressor cell function during the initial culture

period.

3. There was no significant correlation between the percentage of suppressor T

lymphocytes and suppressor cell removal index at 1.5 ㎍/ml of Con A.

4. Out of 7 patients with systemic lupua erythematosua, the 2 untreated cases

revealed the mean value of suppressor T lymphocytes and suppressor cell removal

index at 1.5 ㎍/ml of Con A to be 17.0±1.4% and 0.8±0.1 respectively, while the

rest of 5 treated patients showed 15.0±3.6% and 0.9±0.4. There was no

statistically significant difference by treatment but these valves were

significantly lower than those of healthy controls.

5. Out of 16 patients with Graves' disease, the 12 hyperthyroid cases revealed

the mean value of suppressor T lymphocytes and suppressor cell removal index at

1.5㎍/ml of Con A to be 19.1±4.5% and 0.8±0.3 reapectively, while the rest of 4

euthyroid patients showed 17.5±3.9% and 1.0±0.2. There was no statistically

significantly difference by thyroid function status but these values were

significantly lower than those of healthy controls.

6. A significant reduction in suppressor cell removal index was observed in the

patients with autoimmune diseases, especially at 1.5 ㎍/ml of Con A, suggesting the

presence of a true suppressor cell defect.

In conclusion, the mean percentage of suppressor T lymphocytes and suppressor

lymphocyte function in systemic lupus erythematosus and Graves' disease patients

were significantly lower than in healthy controls. The ability to define T cell

subpopulation will prove to be of practical value and help to provide a better

understanding of diseases associated with autoimmunity.