혈액배양에 사용되는 각종 thioglycollate 배지에서의 혐기성 세균의 증식 비교

Abstract

[영문]

[한글]

혐기성 세균 균혈증이 호기성 세균 균혈증 보다는 드물지만, 적절한 항균요법이 시행되

지 않으면 환자의 사망율이 48%에 달하므로, 혈액에서의 혐기성 세균의 배양은 양성율이

높고 신속한 방법을 써야 된다고 하겠다.

혈액에서 혐기성 세균을 배양하기 위해서는 여러가지 thioglycollate 배지가 오래전부

터 널리 사용되어 왔고, 우리 나라에서는 아직도 주로 이 방법이 이용되고 있다. 혐기성

세균 중에는 영양 요구도가 커서 증식이 잘 않되는 것이 많다. 혐기성 세균의 증식은 Dif

co회사의 Fluid thioglycollate medium(FTM-D)에서 보다 Brewer thioglycollate medium (

BTM-B)에서 더 양호함이 보고된 바 있다. 그러나 최근의 실험에서 BBL회사의 FTM (FTM-B)

은 BTM (BTM-B)보다 우수한 상반된 성적이 관찰된 바가 있어서, 이들 배지의 성능 비교가

필요하였다.

배지에 따른 혐기성 세균의 증식을 비교하기 위해서는 건조 배지인 BTM-B, BTM-D, FTM-

B 및 FTM-D로 만든 액체 배지가 30 ml 든 병과, 대조로 BACTEC NR 7A 배지를 이용하였다.

Clostridium perfringens, Bacteroides capillosus, B. corporis, B. fragilis, B. thet

aiotaomicron, Gemella (Streptococcus) morbillorum, Streptococcus intermedius, Pepto

streptococcus anaerobius, P. asaccharolyticus, P. magnus, P. micros, P. prevotii, P

. productus의 10배수 단계 희석 부유액을 시험 배지에 접종하고 35℃에 배양하면서 중식

여부와 그 정도를 육안으로 관찰하였고, 또한 BACTEC NR 660으로 growth value를 측정하

여 비교하였다.

C. perfringens는 어느 배지에서나 증식이 신속하였으나, 다른 일부 균종에 있어서는 t

hioglycollate 배지의 종류에 따라 증식이 다양하였다. Bacteroides 균종증 B. capillosu

s나 B. corporis의 증식은 느렸으나 thioglycollate 배지의 종류에 따른 큰 차이가 없었

으며, B. fragilis는 BTM-D에서, B. thetaiotaomicron은 FTM-B에서의 증식이 더 양호하였

다. G. morbillorum은 BTM-D에서만 증식이 양호하였으며, S. intcrmedius는 BTM-B이외의

배지에서 증식이 양호하였다. Peptostreptococcus 균종에서도 배지에 따른 증식의 정도가

다양해서, p. anaerobius는 BTM-D에서, p. prevotii와 p. productus는 FTM-B에서만 증식

이 양호하였으며, p. asaccharolyticus, p. magnus 및 p. micros는 BTM-B와 BTM-D에서의

증식이 FTM-B나 FTM-D에서보다 양호하였다. 한편 대조로 사용한 BACTEC NR 7A 배지에서는

p. anaerobius와 p. micros를 제외한 다른 혐기성 세균의 증식이 모두 양호하였다. Cook

ed meat medium이 첨가된 FTM-D에서는 p. anaerobius와 p. micros의 증식이 개선되며, B.

capillosus, p. productus 및 G. morbillorum의 증식도 NR 7A에서와 같은 정도로 신속하

였다.

실제의 환자의 혈액 배양시에는 혈액이 혐기성 세균의 증식을 촉진시키기도 하고, 세균

의 증식을 억제시킬 수도 있으므로 이 연구 결과가 실제 혈액 배양시의 성적을 반영할 수

있을 지는 의문이다. 따라서 환자의 혈액이 함께 들어있을 때의 증식 성적의 검토가 필

요하다고 하겠다.

이 연구에서는 BTM-B, BTM-D, FTM-B 및 FTM-D의 어느 것을 사용해도 임상 검체에서 흔

히 분리되는 모든 혐기성 세균 균종 배양에 있어서 만족스런 결과를 얻을 수는 없으나, B

TM에서의 증식이 FTM에서보다 대체로 양호하고 CMM을 첨가하면 좀 더 좋은 결과를 얻을

수 있을 것이라는 결론을 얻었다.

Comparison of the growth of anaerobic bacteria in various thioglycollate media used

for blood culture

Mi Hyang Kim

Department of Medical Science The Graduate School, Yonsei University

(Directed by Professor Yunsop Chong)

A high fatility rate of 48% was reported in anaerobic bacteremia when proper

antimicrobial agent was not administered. Use of a rapid and sensitive culture

method is very important for the treatment of anaerobic bactermia patients. Various

thioglycollate media have been used for anaerobic blood cultures. Some anaerobic

bacteria are nutritionally fastidious. Depending on investigators better growth was

reported either in Brewer thioglycollate medium (BTM) of a manufacturer or in fluid

thioglycollate medium (FTM) of another manufacturer. Therefore, it was necessary to

compare the BTM and FTM from both manufacturers.

Dehydrated FTM (BBL, FTM-B: Difco, FTM-D) and BTM (BBL, BTM-B: Difco, BTM-B) were

rehydrated and 30-ml amounts were distributed into vials. BACTEC NR 7A medium was

used for comparison. Clostridium perfringens, Bacteroides capillosus, B. corporis,

B. fragilis, B. thetaiotaomicron, Gemella morbillorum, Streptococcus intermedius,

Peptostreptococcus anaerobius, P. asaccharolyticus, P. magnus, P. micros, P.

prevotii and P. productus were investigated in this study. Ten- to 100-fold serial

dilutions of the FTM-D cultures of the organisms were inoculated into the test

media and incubated at 35℃. Growths were compared by both visual observations and

the growth value determinations with BACTEC NR 660 system.

Growth of C. perfringens was rapid in all of the media. Growth of B. capillosus

and B. corporis were slow, but similar in all of the media. Better growth of B.

fragilis was noted in BTM-D, and B, thetaiotaomicron in FTM-B, respectively. G.

morbillorum showed better growth in BTM-D only, and S. intermedius in BTM-D, FTM-B

and FTM-D. Better growth of Peptostreptococcus observed were: P. anaerobius in

BTM-D, P. prevotii and P. productus in FTM-B, P. asaccharolyticus, P. magnus and P.

micros in BTM-B and BTM-D, respectively. With the exception of P. anaerobius and P.

micros, all of the test organisms grew well in NR 7A medium.

In the cooked meat-supplemented FTM-D, the growth of P. anaerobius and P. micros

were improved and the growth of B. capillosus, P. productus and G. morbillorum

became as good as in NR 7A. In the actual patients' blood culture, blood may

stimulate or inhibit growth of anaerobes. Therefore, further evaluation of the

media with actual blood culture is considered necessary.

It is concluded from this study that none of BTM-B, BTM-D, FTM-B and FTM-D

support good growth of all anaerobic bacteria, but in general, growth of the

organisms are better in BTM than in FTM and that cooked meat supplementation may

improve the performance of various thioglycollate media.