Interleukin-12와 Decorin 동시 발현 종양세포 살상 아데노바이러스가 Regulatory T 세포의 면역억제 기능에 미치는 영향

Abstract

항암 면역 치료법은 방사선 요법, 약물 요법과는 달리 우리 몸의 면역 체계를 활성화시킴으로써 암세포만을 특이적으로 제거한다. 그러나 암은 종양내 면역 억제 환경을 조성하여 활성화된 항종양 면역반응으로부터 회피할 수 있다. 따라서 종양의 면역 억제 환경을 차단하고 종양의 면역원성을 부여함으로써 면역 감시 체계에 암 세포를 노출시켜 항종양 면역반응을 유도하는 것이 중요하다.항암 면역 치료법의 하나로 면역 증진 사이토카인 유전자 치료법이 연구되고 있다. 특히 Interleukin(IL)-12는 우수한 항암 면역반응을 유도할 수 있음이 보고되고 있다. 본 연구에서 종양 선택적 살상 아데노바이러스를 이용하여 종양세포 특이적으로 면역 체계를 활성화 시키기 위하여 E1 region에 IL-12 cDNA를 도입하고, 종양내 면역억제 환경을 극복하기 위해 E3 region에 Decorin cDNA을 도입하여 이들의 발현이 가능한 재조합 아데노바이러스 RdB/IL12/hDCN을 개발하였다.BALB/c 생쥐의 4T1 유방암 모델에서 항종양 효과를 분석하여 RdB/IL12 또는 RdB/IL12/hDCN을 투여한 생쥐에서 종양의 성장이 억제되는 것을 관찰할 수 있었다. 또한, IL-12만 단독으로 발현하는 RdB/IL12에 비해 IL-12와 Decorin을 동시에 발현하는 RdB/IL12/hDCN을 투여한 경우 더욱 향상된 항종양 효과를 보였다. 이러한 RdB/IL12/hDCN에 의한 향상된 치료효과는 면역기능 억제를 유도하는 사이토카인 Transforming growth factor-β (TGF-β)의 감소된 발현과 림프절 세포에서 Regulatory T (Treg) 세포의 감소에 의한 것으로 확인하였다. 또한, 종양조직 내 면역억제 환경을 극복함으로써 항종양 면역반응을 수행하는 CD4+와

CD8+ T 세포군이 RdB/IL12/hDCN에 의해 증가된 것을 확인할 수 있었으며, Interferon(IFN)-γ enzyme-linked immune spot (ELISpot)을 시행하여, IFN-γ를 분비하는 세포군집도 증가함을 관찰하였다. 뿐만 아니라 RdB/IL12/hDCN을 투여한 생쥐의 종양조직 내에서 Type-1 면역반응이 유도됨을 T helper 1(Th1) 사이토카인의 발현이 증가되는 것을 통해 확인 할 수 있었다. 본 연구에서 제작된 재조합 아데노바이러스 RdB/IL12/hDCN은 종양 선택적 아데노바이러스인 RdB에 의해 유도되는 종양세포 특이 항종양 효과와 IL-12와 Decorin의 종양세포 특이적 발현에 따른 면역억제 환경을 극복함과 동시에 항종양 면역반응을 유도하여 더 강력한 종양 세포 특이적 항종양 효과를 보여주었다. 항암 면역치료의 한계인 면역억제 환경을 극복함으로써 국소 암의 치료, 암의 재발 억제, 전이암의 치료에도 이용될 수 있을 것으로 예상된다.