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Epstein-Barr virus 감염 B 세포에서 miR-22에 의한 p21Waf1/Cip1의 발현 조절

Other Titles
 Regulation of p21Waf1/Cip1 expression by miR-22 in Epstein-Barr virus infected B cells 
Authors
 송경주 
Issue Date
2012
Description
의과학과/석사
Abstract
Epstein-Barr virus (EBV)는 감마 허피스 바이러스로 사람의 종양 형성과 관련된 종양 바이러스이다. 바이러스 잠복기 유전자 중에서 EBNA2는 세포에 EBV가 감염되었을 때 발현되는 종양 형성에 중요한 바이러스 단백질로 세포 유전자의 전사 활성을 일으킨다. EBNA2는 세포 주기를 억제하여 종양의 증식을 감시하고 억제하는 기능을 하는 p21Waf1/Cip1의 발현도 활성화 시킨다. 종양 형성 과정에서 p21Waf1/Cip1의 단백질 발현은 감소되어야 하므로, microRNA (miRNA)에 의한 유전자 번역 억제가 일어나는 것을 조사하였다. B 세포에 EBV가 감염되었을 때 발현되는 miRNA를 miRNA microarray를 시행하여 찾았고, TargetScan을 이용하여 p21Waf1/Cip1을 표적으로 하는 miRNA를 조사한 결과, miR-22가 EBV 감염에 의해 발현이 증가하며 동시에 p21Waf1/Cip1을 표적으로 하는 것을 알아내었다. MiR-22의 표적이 p21Waf1/Cip1임을 확인하기 위하여 p21Waf1/Cip1의 3’ UTR을 가진 reporter plasmid를 이용하여 reporter assay를 시행하여 감염 초기에 발현되는 EBV miRNA인 mir-BHRF1-3와 miR-22에 의하여 p21Waf1/Cip1의 발현이 억제되는 것을 확인하였다. 또한, miRNA의 저해제인 2’-O-Methyl miR-22를 SNU719 세포에 처리해 주었을 경우에 p21Waf1/Cip1의 유전자 및 단백질 발현이 증가하는 것을 확인하였고, 세포 주기가 억제되는 것이 관찰되었다. 이는 miR-22 를 억제시키고 EBV를 감염시킨 Ramos 세포에서 p21Waf1/Cip1의 발현이 증가하는 것으로도 확인할 수 있었다.이러한 실험 결과를 통하여 EBV에 감염된 B 세포에서 EBNA2에 의하여 증가된 p21Waf1/Cip1이 miR-22 및 mir-BHRF1-3의 영향으로 단백질 발현이 억제되는 것을 확인하였다.
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https://ir.ymlib.yonsei.ac.kr/handle/22282913/134266
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