사람 양막과 돼지 안구에서 분리한 망막조직편의 체외환경에서 조직유착과 양막의 망막색소상피세포 변성억제효과

Abstract

[한글]

감각망막층의 결손 후 유리체로 유리된 세포에 의해 망막표면과 유리체에 섬유화가 발생하게 되고 섬유조직의 수축으로 망막을 견인하게 되어 증식유리체망막병증이 발생한다.

감각망막의 결손 부위를 양막으로 막을 수 있다면 증식유리체망막병증의 예방이 가능할 것으로 보인다.

본 연구에서 돼지 안구의 망막편과 사람 양막을 체외 배양하여 망막과 양막간의 조직유착 여부와 조직유착이 된 경우에 감각망막편과 망막색소상피편의 조직학적 변화를 확인하고자 하였다. 그리고 양막에 의해 망막색소상피세포의 변성이 억제되는지 알아보고자 하였다. 양막은 정상 제왕절개 산모의 태반에서 분리한 것을 사용하였고 돼지 안구에서 분리한 망막편을 사용하였다. 유리체면을 아래로 향하게 한 감각망막편과 망막색소상피세포편을 상피측 상향과 실질측 상향으로 구별하여 이미 위치시킨 양막에 각각 올려놓은 후 배양 1주부터 5주까지 1주 간격으로 부착 여부를 확인하였다. 감각망막편은 glial fibrillary acidic protein (GFAP) 면역조직화학염색, 망막색소상피편은 Masson's trichrome 염색을 시행하여 조직학적 변화를 확인하였다. 양막의 망막색소상피세포에 대한 변성억제효

과를 확인하기 위하여 투과전자현미경을 이용하여 검체를 관찰하였다. 실험 4주까지는 매주간 유착률에 거의 차이를 보이지 않았으나 5주째에는 이전에 비하여 유착률이 급격히 감소하는 경향을 보였다. 양막 표면의 방향과 조직편의 종류에 따른 유착률은 양막상피면 접촉보다는 양막실질면 접촉이, 감각망막편보다는 망막색소상피세포편이 더 유착률이 높았다. 양막의 망막색소상피세포에 대한 변성억제효과는 양막의 부착면이 실질면일 때 더 높은 것이 관찰되었다.

본 연구의 결과로 양막은 감각망막 결손부위에 덮개 역할을 할 수 있을 것으로 보이며 기계장벽효과와 세포변성억제효과로 증식유리체망막병증을 예방할 수 있을 것으로 기대된다.

[영문]

Cells spreading through vitreous after sensory retinal defect are known to be transformed and produce the collagen. The collagen fibers form fibrous membranes in vitreous and on retinal surface, thereafter membranes contract and pull sensory retina. Ultimately tractional retinal detachment will develop and proliferative vitreoretinopathy will occur. The amniotic membrane can be used as a candidate limiting the spreading of cells and covering the defect of sensory retinal area.

In this study, tissue adhesion rate between the human amniotic membrane and the porcine retinal tissue was evaluated, and histological change of the sensory retina and the retinal pigment epithelium was studied. And the inhibition effect of amniotic membrane in retinal pigment epithelial cell transformation was evaluated.

The amniotic membrane from normal human placenta and the retinal tissue flap from normal pig were used. The sensory retinal and the retinal pigment epithelial flap were placed on the amniotic membrane in culture disk. Tissue adhesion was evaluated and graded at 1,2,3,4 and 5 weeks after the organotissue culture. Glial fibrillary acidic protein immunohistochemical staining of the sensory retina and Masson's trichrome staining of the retinal pigment epithelial flap were performed to find histological changes of the retinal flaps. Transmitted electron microscope

examination was performed to study the stabilization effects of amniotic membrane to retinal pigment epithelium.

In the result, tissue adhesion rates between the amniotic membrane and the retinal tissue flap showed no significant interval change until 4th week, but tend to decrease in 5th week of organotissue culture. Tissue adhesion rate was higher in

the chorion-side culture than in the amnion-side, and the retinal pigment epithelial flap than the sensory retinal flap. Retinal pigment epithelial cell stabilization effect of amniotic membrane was confirmed by ultrastructural examination. The inhibition of cell transformation was higher in the chorion-side culture than amnion- side.

In view of above findings, it is expected that the amniotic membrane play a role in covering the defected sensory retinal area. Amniotic membrane can be used for prevention of proliferative vitreoretinopathy by mechanical barrier and chemical stability effect to retinal pigment epithelium.