자유생활 아메바의 외계환경 및 마우스 체내에서의 운명에 관한 연구

Abstract

[한글]

자연환경속에 널리 분포되어 있으며 원발성 아메바성 뇌수막염을 일으키는 자유생활 아메바 즉 Acanthamoeba culbertsoni, Naegleria fowleri등이 마우스의 비강이 아닌 구강으로 들어왔을 경우 뇌이행이 가능한지 또는 자유생활 아메바가 구강에서 소화관으로 들어가는 경우 생존할 수 있는지, 만약 생존한다면 뇌이행을 할 수 있는지 여부를 조사하고자유생활 아메바가 숙주에 들어오기전 체외환경(조미료, 하수, 수도물, 농약)에서의 저항성 또는 생존 가능성을 파악하여 그들의 운명을 연구할 목적으로 실험 에 착수하였다. Acanthamoeba culbertsoni와 Naegleria fowleri(Belgium, Prince Leopold Institute of Tropical Medicine의 Jadin, J.B.교수 제공)의 배양은 무균 배지인 CGVS배지(Willaert 와 LeRay, 1972)를 이 용하였다. 마우스 소화관 내용물에 서 자유생활 아메바 검출을 위하여 Kasprzak와 Mazur(1972)에 의한 agar plate 방법을 사용하였다.

자유생활 아메바에 감염이 잘되어 실험적 뇌수막염이 잘 발생된다고 알려진 건강한 20gm 내외의 백색 마우스를 실험에 사용하였다.

그 결과를 요약하면 다음과 같다.

1. Naegleria fowleri 및 Acanthamoeba culbertsoni 영양형을 마우스 구강에 떨어뜨려감염시키고 12∼15일후 뇌조직을 조사한바 10마리중 2마리에서 자유생활 아메바를 검출할 수 있었다. 비강으로 감염시킨 마우스에서는 5마리 모두에서 자유생활 아메바가 비강에

서 뇌조직으로 이행함을 알 수 있었다.

2. 자유생활 아메바 영양형을 마우스구강에 감염시켜 소화관중 위, 소장, 직장의 내용물을 배양하였으나 자유생활 아메바를 검출할 수 없었다.

3. 소화액의 성분인 mucin, pepsin, glucose, trypsin 함유 배지에서 Acanthamoeba culbertsoni 영양형이 분열 증식하였으나 HCI과 pepsin 함유배지에서는 모두 사멸하였다.

4. Naegleria.fowleri영양형은 소금, 간장, 마늘, 식초, 고추등 조미료가 함유된 배지에서 배양 96시간후까지 생존해 있음을 관찰할 수 있었다.

5. 하수와 수도물에 Naegleria fowleri 영양형을 혼합하여 실온에 방치하였더니 75시간후까지 생존해 있음을 볼 수 있었다.

6. 농약 Kasugamin, 2, 4-D, Bla-s, Hosbel의 실용농도에서 자유생활 아메바 Acanthamoeba culbertsoni 영양형은 생존해 있음을 관찰하였으나 Diazinon과 Cartap의 실용농도에서는 사멸되었다.

[영문]

This study was designed to know whether free-living amoebas introduced orally could migrate and invade the central nervous system. Acanthamoeba culbertsoni and Naegleria fowleri were used to test the possibility of survival or adaptation in the gastro-intestinal tract of the host, and the various environmental

circumstances as well.

Acanthamoeba culbertsoni and Naegleria fowleri were cultivated with CGVS medium (Willaert and LeRay, 1973). For the detection of free-living amoebas inoculated from the gastro-intestinal contents, a non-nutrient agar plate described by Kasprzak and Mazur (1972) was used. White mice weighing about 20 gm were used in this study, which are known to be susceptible to free-living amoebas. Each mouse was infected orally or intranasally with Acanthamoeba culbertsoni or Naegleria fowleri under anesthesia with secobarbital by in-traperitoneal injection. Effect of components of gastro-intestinal juice (mucin, pepsin, HCI, glucose and trypsin) on survival of free-living amoebas was examined.

For the viability test, free-living amoebas trophozoites were added to the culture medium containing natural food-preservatives (salt, soybean sauce, garlic, vinegar and red pepper) of various concentrations individually. The survival of free-living amoebas in tap water and sewage, and against pesticides were also

examined by in vitro.

The results are as follows :

1) Acanthamoeba culbertsoni and Naegleria fowleri were detected from the mouse brain tissue in two out of 10 mice inoculated orally.

2) Free-living amoebas were not detected from the content of gastro-intestinal tract of mice.

3) Trophozoites of Acanthamoeba culbertsoni and Naegleria fowleri in the culture medium containing components of gastro-intestinal juice (mucin, pepsin, glucose and trypsin) survived and propagated well, but could not survive in the medium containing HCI.

4) Naegleria fowleri trophozoites survived in the culture medium containing natural food-preservative substances up to 95 hours.

5) Naegleria fowleri trophozoites survived well in sewage or tap water.

6) Acanthamoeba culbertsoni trophozoites were tolerated well in the pesticides (Kasugamin,2,4-D, Bla-S and Hosbel) of practically applicable concentration, except in Diazinon and Cartap.

The overall results suggest that two species of free-living amoebas can resist to various environmental factors but are easily destroyed by gastric juice.