가토 난관결찰시 초래되는 난관상피 변화에 관한 형태학적 연구

Abstract

[한글]

과거 인체난관의 형태학적 연구는 주로 광학현미경적 연구(Novak과 Everett, 1928; Fredricsson, 1959)가 대부분이었으며 약간의 투과전자현미경적 연구(Bjorkman과 Fredricsson, 1962; Shimoyama, 1963; Clyman, 1966)도 있었으나 최근에는 주사전자현미경에 의한 인체 및 포유동물의 난관의 미세구조에 관한 많은 연구(Ferenczy등 1972; Patek등 1972a, b; Patek등 1973a, b)가 보고되고 있다.

또한 최근에는 난관결찰후 복원수술의 요구도가 점차 증가하면서 이에 따른 미세복원수술의 많은 발전을 가져왔으나(Brosens와 Winston, 1979) 실제로 난관의 해부학적 소통율 만큼 임신율은 높지 않으며 오히려 난관임신의 빈도가 올라가는 등의 바람직하지 못한 임상적 결과를 초래할 수 있는데 이는 수술의 기술적인 문제 뿐만 아니라 난관의 조직학적 손상정도와도 밀접한 관계가 있다고 하며 따라서 난관소통 검사로 수술의 예후를 판정하는 것은 문제가 있다고 한다(Vasquez 1980).

본 연구는 가토를 이용하여 난관결찰후 초래되는 난관상피조직의 변화를 난관의 부위별 및 결찰후 경과된 시간에 따라 광학 및 전자현미경을 이용하여 특히 미세구조의 형태학적 변화를 관찰하였으며 이는 여성불임의 난관인자와 난관결찰 후에 발생하는 난관임신의 이해 및 결찰한 난관에서의 미세복원수술후 그 성공율을 높이기 위해 선결해야할 난관의 조직학적 기초 자료로 활용할 수 있다고 사료되어 본 연구를 시행하였다.

연구재료 및 방법

연구대상으로는 난관결찰을 시행한 실험군 15마리와 대조군 3마리의 가토를 사용하여 광학현미경, 투과전자현미경 및 주사전자현미경 검색을 실시하였다.

난관결찰후 좌우난관 공히 자궁각으로부터 3cm되는 부위에서 루프의 높이가 1cm되도록 Babcock clamp로 들어 올린 후 chromic catgut 4-0를 사용하여 단순결찰하였다.

난관결찰 3일, 1,2,4,8주 후에 좌우 난관에서 다음의 3부위를 생검하여 조직학적 검색을 시행하였다.

1. 결찰부위를 기준하여 난관채쪽 부위(팽대부)

2. 결찰부위 (루프)

3. 결찰부위를 기준하여 자궁쪽 부위 (협부)

대조군은 실험군과 상응하는 난관의 부위를 검색하였다. 광학현미경적 검색은 통상의 처리과정을 거친 후 일반적인 조직변화를 관찰하기 위한 hematoxylin eosin 염색과 분비활동을 관찰하기 위한 periodic acid Schiff 염색을 시행하였다. 투과전자현미경적 검색

은 난관조직을 부위별로 1mm**3 크기로 세절하여 3% glutaraldehyde(phosphate buffer, PH 7.4) 용액에 전고정하고 1% osmium tetraoxide(phosphate buffer, pH 7.4)용액에 2시간 후고정한 후 통상적인 제작과정을 거쳐 Hitachi H-500형 투과전자현미경으로 관찰하였고 주사전자현미경 검색은 난관을 입체현미경 관찰하에 종으로 절개하여 난관강을 노출시킨 후 5mm**3 크기로 세절하여 투과전자현미경과 같은 방법으로 고정한 후 통상의 방법을 거쳐 critical point drier로 건조시킨 후 Hitachi S-450형 주사전자현미경으로 관찰하였다.

연구성적 및 결론

1. 광학현미경적 소견으로 난관단순결찰은 루프부위의 현저한 난관강확장과 점막추벽소실을 초래하였고 상피세포의 섬모소실과 분비활동 감소를 가져왔으나, 인접부인 팽대부와 협부에는 일시적으로 미약한 섬모소실과 분비활동 저하를 가져왔다.

2. 난관결찰직후 루프부위에 충혈과 더불어 불완전괴사가 일어나고 상피세포가 일시적으로 완전 탈락하였다가 2주 후부터는 상피세포와 섬모의 재생이 시작되었다.

3. 투과전자현미경적 소견으로는 루프부위 상피세포에서 섬모의 단축과 소실, 세포질내 분비과립의 감소, 사립체 종창 및 조면소포체의 확장등이 관찰되었으며 그 정도는 난관결찰후 1주와 2주에 가장 현저하였다.

4. 주사전자현미경적 소견으로는 루프부위에서 점막추벽의 소실, 섬모의 응집과 소실 및 미세융모의 소실을 관찰할 수 있었으며 그 정도는 3일, 1주 및 2주째에 가장 현저하였다.

5. 투과 및 주사전자현미경적 소견상 팽대부와 협부에 있어서의 미세구조적 변화는 거의 관찰할 수 없었다.

이상과 같은 소견을 종합하여 보면 가토 난관결찰후에 일어나는 조직학적 변화는 거의 대부분이 결찰한 루프부위에서 관찰되었고 인접 팽대부나 협부 점막에서는 일시적으로 극히 미약한 변화만을 보였으며 이같은 사실은 차후 결찰한 난관의 복원수술 시행시 그 예후에 아무런 지장이 없음을 입증해 주는 것으로 사료되었다.

[영문]

The study of the morphologic structure of the human fallopian tube has mainly been limited to light microscopical investigations(Novak and Everett, 1928; Fredricsson, 1959). To some extent also a few transmission electron microsurgical explorations(Bjorkman and Fredricsson, 1962; Shimoyama, 1963; Clyman, 1966) have been performed. A lot of scanning electron microscopic study on tubal microscopic structure of human and mammal have been reported recently.

The increasing demand for reversal of sterilization has stimulated the development of microsurgical techniques. However, the pregnancy rate is not so high as the patency rate and the

incidence of tubal pregnancy is still elevated. It is possible that these poor fertility outcome could be related not only to the technique used but also to the degree of the tubal damage subsequent to sterilization. The object of this study is to observe the morphologic changes of rabbit tubal epithelial surface subsequent to ligation according to different biopsy site and to the intervals of time with the use of light microscope and electron microscope.

And this histologic assessment may be used as fundamental data to understand the histogenesis of tubal pregnancy after tubal sterilization and increase the success rate of reversal of sterilization.

Material and Methods

The material was obtained from fifteen sterilized female rabbits and three controls. All these animals were investigated histologically with the use of light microscopy, transmission electron microscopy and scanning electron microscopy.

The technique of sterilization was simple ligation with chromic catgut 4-0 of both tubes. The tubal portions 3cm lateral to uterine cornu on both sides were elevated with Babcock clamp and ligated so as to the height of loop to be 1cm.

Relaparotomy was performed on these animals after the following intervals of time; 3 days, 1,2,3,8 weeks. Biopsy specimens taken from three different segments of each tube are as follows.

a. Segment adjacent to the tubal ligation on the ampullary portion

b. Loop Of ligated segment

c. Segment adjacent to the tubal ligation on the isthmic portion

The light microscopic examination was performed with hematoxylin and eosin stain to atudy cellular detail and periodic acid Schiff stain to detect cellular secretion after preparation in the usual manner. The transmission electron microscope examination was performed with the Hitachi model H-500 transmission electron microscope after routine Preparation.

For the scanning electron microscopy, all biopsy specimens were immediately opened longitudinally under the stereomicroscope to expose the tubal lumen. Hitachi model S-450 scanning electron microscope was used to examine the epithelial surface of tube after routine preparation.

Results and Summary

The morphologic study of rabbit tubal epithelial surface subsequent to simple ligation with chromic catgut was performed by light microscope, transmission and scanning electron microscope.

The results were summarized as follows:

1. In light microscopic findings, simple tubal ligation brought marked dilatation of tubal lumen, lose of mucosal folds, loss of cilia and decrease of secretory activity at the loop of ligated segment. But slight change of loss of cilia and decrease of secretory activity was observed at the segment adjacent to the tubal ligation on the ampullary portion and that on the isthmic portion.

2. Congestion, incomplete ischemic necrosis and complete desquamation of epithelial cell were observed at the loop of ligated segment immediate after tubal ligation, but regeneration of epithelial cell and cilia began from post ligation 2nd week.

3. Transmission electron microscopy showed shortening and loss of cilia, decrease of cytoplasmic secretory granules, mitochondrial swelling and dilatation of rough endoplasmic reticulum in epithelial cells at the loop of ligated segment. The most prominent changes were observed at Post ligation 1st and 2nd week.

4. Scanning electron microscopy showed loss of mucosal folds, aggregation and loss of cilia and loss of microvilli at the loop of ligated segment. The most prominent changes were observed at post ligation 3rd day, 1st and 2nd week.

5. No remarkable ultrastructural changes were observed at the segment adjacent to the tubal ligation on the ampullary portion and that on the isthmic portion by transmission and scanning electron microscopy.

In summary the histologic changes of rabbit tubal epithelium after simple ligation confined mainly at the loop of ligated segment. Only minimal changes were present at the segment adjacent to the tubal ligation on the ampullary Portion and

that on the isthmic portion.

These facts suggest that there would be no disturbances in reversal operation after tubal ligation.