요 중 벤지딘 대사물질 분석의 전처리 방법에 관한 연구

Abstract

[한글]

벤지딘은 직접 피부와 접촉하여 흡수되기도 하고, 증기 상태일 때도 점막이나 눈을 통하여 흡수되기 때문에 개인 및 지역시료 포집 방법으로 공기 중 농도를 측정하고 근로자의 노출 실태 평가에서 생물학적모니터링을 병행하여야 한다.

본 연구는 요 중 벤지딘 대사물질의 분석에 있어 전처리 방법들을 비교하고 요의 pH에 따른 저장 온도 및 저장 기간에 따른 회수율을 비교하여 분석 목적에 맞는 전처리 방법을 제시하고 요 시료의 저장에 따른 안정성을 평가하고자 하였다.

1. 고체상 추출법을 이용한 전처리 방법에 따른 회수율을 비교한 결과 염기 가수분해한 군의 회수율이 벤지딘 67.4 ％, 모노아세틸벤지딘 105.1 ％, 디아세틸벤지딘 115.8 ％로 높았다.

2. 액상 추출법을 이용한 전처리 방법에 따른 회수율을 비교한 결과 0.1 M 과염소산으로 역추출하는 방법의 회수율이 벤지딘 105.7 ％, 모노아세틸벤지딘 94.2 ％, 디아세틸벤지딘 72.8 ％로 높았다.

3. 벤지딘, 모노아세틸벤지딘, 디아세틸벤지딘을 염기 가수분해하여 총 벤지딘으로 분석했을 때는 0.1 M의 염산과 0.1 M의 과염소산으로 역추출하는 방법 간 회수율의 차이가 없었다.

4. 요 시료를 pH 3, pH 7, pH 12로 만들어 실온 및 냉동 보관하여 28일 동안 7일 단위로 회수율을 비교하였을 때 저장 온도 및 저장 기간에 따른 회수율의 차이가 없었다.

본 실험 결과 고체상 추출법에 의한 요 중 벤지딘 대사물질 분석은 염기 가수분해 방법이 적합하며 액상 추출법에 의해 벤지딘 대사물질 분석에는 0.1 M의 과염소산으로 역추출하는 방법이 적합하다. 요 시료는 28일 동안 저장 기간 및 저장 온도에 따른 회수율의 차이가 없었다.

벤지딘 글루쿠로나이드와 모노아세틸벤지딘 글루쿠로나이드 물질들은 산성인 소변에서 일급아민으로 가수분해되어 방광암을 유발한다고 알려져 있으나 본 연구에서는 이 물질들에 대한 연구가 이루어지지 못하였다. 향후 연구에서는 실제 근로자들의 요를 대상으로 이들 물질의 전처리 방법에 따른 변화 양상에 대한 연구가 이루어져야 한다.

[영문]

This study evaluates the pretreatment for analysis of benzidine metabolites in urine by measuring the recovery rates according to the temperature and periods of storage of the urine.

By the solid phase extraction, the recovery rates of basic hydrolysis are benzidine 67.4 %, monoacetylbenzidine 105.1 %, and diacetylbenzidine 115.8 %, respectively.

By the liquid extraction, the recovery rates of back-extraction into 0.1 M perchloric acid are benzidine 105.7 %, monoacetylbenzidine 94.2 %, diacetylbenzidine 72.8 %, respectively.

The difference of the recovery rates between the back-extraction into 0.1 M HCl and 0.1 M perchloic acid after basic hydrolysis are 101 % and 98.8 %, respectively.

When the recovery rates of the urinary samples of pH 3, pH 7, pH 12 at 25 ℃ and -76 ℃ are compared for four weeks, there are no differences according to the temperature and the periods of storage.

The above results show that the solid phase extraction and back-extraction by 0.1 M perchloric acid after basic hydrolysis are suitable for the analysis of benzidine metabolites.

There are no difference of the recovery rates of the urinary samples stored at 25 ℃ and -76 ℃ at pH 3, pH 7, pH 12, respectively for 28 days.