각종 간질환에서 RT-PCR을 이용한 G형 간염바이러스 RNA의 검출률

Abstract

[한글]

1989년 C형 간염바이러스가 발견되어 비A비B 간염(non-A, nlul-B hepatitis)의 상당부분은 C형 간염바이러스에 의한 것임이 밝혀졌다. 그러나 C형 간염바이러스에 대한 여러 가지 예민한 검사방법을 이용한 연구에도 불구하고 수혈후 간염 및 community acquired hepatitis의 일부분에서는 C형 간염바이러스가 검출되지 않아 C형 간염바이러스 이외의 다른 비A비B 간염의 병원체가 존재할지도 모른다는 것이 의심되어 왔다. 1996년 비A비B 간염에 이환되어 있는 환자의 혈청에서 새로운 바이러스가 발견되었고 G형 간염바이러스(hepatitis G virus; HGV)라고 명명되었다. G형 간염바이러스는 RNA virus로서 비경구적으로 감염되는 것으로 알려져 있고, 각종 간질환에 이환되어 있는 환자의 혈청으로부터 분리되나 그 임상적 의의는 아직 확실하지 않다. 우리나라에서도 만성간염의 일부분은 B형 및 C형 간염바이러스만으로는 그 원인이 설명되지 않으며, 아직까지 G형 간염바이러스에 대한 보고가 없어 각종 간질환 환자에서 G형 간염바이러스 검출률을 알아보고자 하였다.

1992년부터 1996년까지 연세대학교 의과대학 세브란스병원에서 각종 간질환으로 치료받은 115명의 환자를 대상으로 하였다. 대상환자는 115예중 남자가 63예, 여자가 52예였고, 평균연령은 44세(19세-74세)였으며 평균 혈청 AST, ALT는각각 121.3±278.7 IU/L, 172.2±253.3 IU/L였다. 115예의 대상환자중 58예(50.4%)에서는 간질환의 원인을 알 수 없었고 57예(49.6%)에서는 그 원인을 알 수 있었는데, 확인할 수 있었던 간질환의 원인을 대별해보면 간염바이러스에 의한 경우가 37예(32.2%)로 B형 간염바이러스 감염 19예(16.5%), C형 간염바이러스 감염 17예(14,8%), B형 및 C형 간염바이러스 중복감염 1예(0.9%)등이었고, 비바이러스성 간질환이 27예(17.4%)로 음주 9예(7.9%), 지방간 5예(4.3%), 자가면역성간염 5예(4.3%) 및 원발성담즙성간경변 1예(0.9%) 등이었다. 대상환자를 병기 별로 나누어 보면 지방간 7예(6.1%), 급성간염 26예(22.5%), 만성간염 64예(55.7%), 간경변증 7예(6.1%) 및 간세포암 11예(9.6%) 등이었다. HGV 검출을 위해 환자의 혈액을 채취하여 혈청을 분리한 후 -20 C에 보관하였다가 필요할 때마다 녹여서 사용하였다. 환자의 혈청으로부터 RNA를 분리한 후 역전사효소를 이용하여 complementary DNA(cDNA)를 제조하였다. Linnen등이 보고한 2명의 환자(PNF 2161, R10219)로부터 결정된 HGV 염기서열의 consensus sequeilce의 5' UTR(untranslated region)의 일부를 primer로 사용하여 cDNA를 template로 PCR을 시행한 후 전기영동법을 이용하여 PCR산물을 확인하였다. 확인된 PCR산물은 제한효소인 Apal을 사용하여 HGV specific genome이라는 것을 재확인하였다.

1. 115예의 대상환자중 15예(13.0%)에서 HGV RNA가 검출되었다.

2. HGV RNA 양성예 15예중 남자는 7예, 여자는 8예였고, 평균연령은 48세(19세-72세)였으며, 평균 혈청 AST, ALT는 각각 71.9±45.2 lU/L, 97.4±66.8 lU/L이었다.

3. 간질환의 원인을 알 수 없었던 78예중 8예(13.8%)와 B형 및 C형 간염바이러스에 감염되어 있던 37예중 7예(l8.9%)에서 HGV RNA가 검출되었으나, 비바이러스성 간질환 20예에서는 HGV RNA가 검출되지 않았다.

4. 대상환자의 병기에 따른 HGV RNA의 검출률을 보면 급성간염 26예중 5예(19.2%), 만성간염 64예중 6예(9.4%), 간경변중 7예중 1예(14.3%), 간세포암 11예중 3예(27.3%)에서 HGV RNA가 검출되었으나, 지방간 7예에서는 검출되지 않았다.

5. HGV RNA 양성군과 음성군간에 성별, 연령, 수혈력, ALT수치, 간질환의 원인 및 병기의 차이는 없었다.

이상의 결과로 우리나라의 각종 간질환 환자의 일부분은 G형 간염바이러스에 감염되어 있고, B형 및 C형 간염바이러스와의 중복감염도 있음을 알 수 있었다.

[영문]

After the discovery of hepatitis C virus(HCV) in 1989, subsequent testing revealed that HCV accounted far most, but not all, cases of non-A, non-B hepatitis. This fact suggested the presence of more than one non-A, non-B agents. Recently, nucleotide sequences from a novel virus, termed hepatitis G virus(HGV), were identified in serum from a patient with cryptogenic hepatitis. HGV is an RNA virus and is known to be parenterally transmitted. It has been isolated from patients with various liver diseases but clinical implications of this new agent remain largely unresolved. In Korea, the etiology of substantial fraction of hepatitis has remained undefined and there has been no report concerning HGV.

To determine the infection rate of HGV, RT-PCR of 5' UTR of HGV was performed, rind to understand the clinical implication of HGV, medical records of 115 patients with various liver diseases were reviewed. Of 115 patients, 63 were male and 52 were female. Their mean age was 44 years(19-74) and their mean AST and ALT were 121.3±278.7 IU/L and 172.2±253.3 IU/L, respectively. Of 115 patients, 58(50.4%) had no definite causes of their liver diseases, 37(32.2%) were infected with hepatitis virus and 20(17.4%) had non-viral liver diseases. Among the patients with

hepatitis viruses, 19(16.5%) had HBV, 17(14.8%) had HCV, 1(0.9%) was coinfected with HBV rind HCV. Among the patients with non-viral liver diseases, 9(7.9%) had a history of alcohol abuse, 5(4.3%) had fatty liver, 5(4.3%) had autoimmune hepatitis and 1(0.9%) bad primary biliary cirrhosis. According to their disease status, of 115 patients, 7(6.1%) had fatty liver, 26(22.5%) had acute hepatitis, 64(55.7%) had chronic hepatitis, 7(6.1%) had liver cirrhosis, and 11(9.6%) had hepatocellular carcinoma.

The results were as follows:

1. Of 115 patient, HGV RNA was detected in 15(13.0%) patients.

2. Among the 15 HGV RNA positive cases,7 were male and 8 were female. Their mean age was 48 years(19-72) and their mean AST and ALT were 71.9±45.2IU/L,97.4±66.8 lU/L, respectively.

3. HGV RNA was detected in 8(13.8%) of 58 patients without obvious causes of their fiver diseases and in 7(18.9%) of 37 patients infected with HBV and/or HCV, however none of patients with non-viral liver diseases was infected with HGV.

4. HGV RNA was detected in 5(19.2%) of 26 patients with acute hepatitis, in 6(9.4%) of 64 patients with chronic hepatitis, in 1(14.3%) of 7 patients with liver cirrhosis, and in 3(27.3%) of 11 patients with hepatocellular caroinoma.

5. There was no statistically significant difference in sex, age, history of transfusion, AST, ALT, etiologies and status of liver diseases.

Data from this study suggest that some korean patients with various liver diseases were infected with HGV and HGV can be coinfected with HBV and/or HCV.