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In vitro 모델에서 지방유래줄기세포가 UVB로 광노화시킨 섬유모세포에 미치는 영향

Other Titles
 Effect of adipose derived stem cells on UVB irradiated human dermal fibroblast :in vitro model 
Authors
 이종희 
Issue Date
2010
Description
의학과/박사
Abstract
[한글]지방유래 줄기세포는 분화(differentiation)와 분비작용(paracrine effect)을 통해 다양한 질병 치료 연구에 이용되고 있으며 최근 연구에서 피부 노화에도 긍정적인 효과가 있는 것이 밝혀진 바 있다. 자외선은 피부 노화의 가장 큰 외적 요인으로 이 중 Ultraviolet B (UVB)는 광노화(photoaging)를 일으키는 주 요인이다. 한편, 섬유모세포(fibroblast)는 진피층에서 세포외기질(extracellular matrix)의 생성 및 분해를 조절하는 역할을 하고 있으며 각종 cytokine등을 생산하여 상처를 치유하고 젊은 상태의 피부를 유지하는데 핵심적인 역할을 하고 있다. 그러나 자외선에 노출된 섬유모세포는 collagen degradation의 촉진과 procollagen production의 저하라는 두 가지 기전에 의해 collagen을 감소 시키게 된다.본 연구에서는 in vitro 환경에서 지방유래줄기세포가 광노화 된 인간섬유모세포에 미치는 영향을 확인하고 그 기전을 밝히고자 하였다. 이를 위하여 3명의 건강한 공여자로부터 진피 및 지방조직을 함께 얻은 후 이를 각각 배양하여 섬유모세포가 충분한 수로 자라면 UVB를 조사하여 광노화를 유도하고 β-galactosidase 염색을 통하여 노화를 확인하였다. 노화가 확인된 섬유모세포는 총 3개의 실험군으로 나누었다. 제 1 실험군은 대조군으로서 광노화시킨 섬유모세포를 별도의 처리를 하지 않고 배양하였으며, 제 2 실험군은 광노화시킨 동수의 섬유모세포를 transwell culture 용기를 이용하여 지방유래줄기세포와 함께 배양하였다. 제 3 실험군은 역시 동수의 광노화된 섬유모세포에 3일간 지방유래줄기세포를 배양하여 얻은 conditioned medium을 배지로 배양하였다.세포 증식능을 CCK-8 kit으로 비교한 결과 24시간까지는 세 실험 군 간에 별다른 차이가 없었으나 48시간 이후에는 conditioned medium, transwell culture, 대조군의 순으로 증식이 일어나는 것으로 나타났으며, 72시간에는 conditioned medium군에서만 생존 세포수가 의미 있게 증가하였다. 배양 후 48시간 째에 시행한 RT PCR 결과 대조군에 비하여 두 가지 실험군 모두에서 type I collagen의 생성은 차이가 없었으나, MMP-1과 p16의 발현은 감소하는 결과를 보였다. 마지막으로 apoptosis 확인을 위한 annexinV-PI 염색에서는 실험군에서 광노화된 섬유모세포의 necrosis는 현저히 감소하였고 apoptosis는 오히려 증가하는 것으로 나타났다.결과적으로 지방유래줄기세포는 광노화된 섬유모세포의 증식을 유도하고 노화시 발현되는 p16과 MMP-1을 감소시켜 노화를 역전시키며 광노화된 섬유모세포의 necrosis 억제 및 apoptosis유도 효과가 있는 것으로 생각된다.



[영문]
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Appears in Collections:
1. College of Medicine (의과대학) > Others (기타) > 3. Dissertation
URI
https://ir.ymlib.yonsei.ac.kr/handle/22282913/125133
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