WNK4에 의한 무스카린성 M3 수용체의 세포막 발현 및 활성 조절

Abstract

[한글]

WNK4(with-no-lysine(K) kinase 4)는 serine/threonine kinase로 NCC (Na+Cl- cotransporter)나 ROMK(Renal Outer Medullary Potassium channel) 등의 이온 수송단백의 세포막 발현을 조절하는 물질로 알려져 있다. 본 연구에서는 WNK4가 이온수송단백만을 조절하는 것이 아니라 G단백 연결수용체인 무스카린성 M3 수용체도 조절한다는 것을 알아내었다. HEK293 세포에서 면역침전법을 통해 WNK4와 M3 수용체가 결합함을 확인하였고, WNK4의 kinase domain부분과 M3 수용체의 세번째 세포 내 고리에 결합하고 있음을 확인하였다. 또한 이러한 결합에 의해WNK4가 M3 수용체의 세포막 발현 양을 감소시키는 것을 확인하였다. 이 현상은 HeLa 세포에서의 면역형광염색 실험에서도 일관된 결과를 보였다. WNK4가 M3 수용체의 기능에 미치는 영향을 알아보기 위해M3 수용체 효현제인 pilocarpine으로 세포 내 칼슘농도의 변화를 관찰한 결과 WNK4가 M3 수용체의 활성 역시 억제하는 것을 확인 할 수 있었다. 면역형광염색으로WNK4와 M3 수용체가 SMIE세포와 생쥐의 턱밑샘 조직에서 함께 발현하고 있음을 확인하였고, 이를 통해 WNK4가 M3 수용체의 효소 분비 기능을 조절하는데 관여하고 있을 것이라는 예상을 해 볼 수 있었다. 위의 결과들을 종합해보면, WNK4는 M3 수용체의 세포막 발현 양을 감소시켜 M3 수용체 활성을 감소시킴을 확인 할 수 있었다.

[영문]