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적출 간 관류법을 이용한 흰쥐에서의 벤지딘 대사에 관한 연구

Other Titles
 (The) study on metabolism of benzidine in the isolated perfused rat liver 
Authors
 배문주 
Issue Date
1995
Description
산업보건학과/석사
Abstract
[한글]

벤지딘은 아조염료 제조에 주로 사용되는 방향족 아민으로서 인체에 방광암을 일으키는 발암물질로 보고되고 있으며, 동물실험에서는 간종양을 발생시키는 것으로 보고되었다. 이 연구는 벤지딘 대사물질 분석방법의 최적 조건를 제안하고 적출간 관류법을 통해서 벤지딘 대사물질을 확인하고 대사물질의 시간적 변화를 관찰하는 데 목적이 있다.

아세틸벤지딘은 합성하여 엷은막 크로마토그래피와 고성능액체크로마토그래피로 분리하여 사용하였다. 벤지딘과 벤지딘 대사물질은 고성능액체크로마토그래피를 이용하여 분리

하였다. 그리고 베지딘과 아세틸벤지딘은 전위값을 0.75V로 하는 전기화학검출기로, 디아세틸벤지딘은 파장287nm의 자외선검출기로 검출하는 것이 최적의 조건이었으며, 이와 같은 조건을 만족시키기 위해 동일 분석시료를 두 종류의 검출기에 연속적으로 흐르게 하여

검출하였다.

관류액을 간과의 평형을 이루기 위해 30분 정도 관류시켰고, 이 시료를 채취하여 바탕시료로 하였다. 시료채취는 관류시간 0,10,20,30,60,90,120분에 각각 채취하였다.

관류액을 분석한 결과, 적출 간 관류법을 통한 벤지딘의 대사물질은 아세틸벤지딘과 디아세틸벤지딘이며 다른 대사물질은 관찰되지 않았다. 벤지딘과 벤지딘대사물질의 시간적변화를 보면, 2벤지딘은 관류시간 30분까지 60% 이상이 대사되었으며. 대사시간 1사간까지 완전히 대사되어 관류액에서는 검출할 수 없었다. 또 아세틸벤지딘은 관류시간 30뿐까지 계속해서 증가하다가 점차 감소하는 결과를 보여 부었고, 120분까지 낮은 수준으로 존재하였다. 그리고 디아세틸벤지딘은 관류시간 초반부터 계속 증가하여 관류시간 30분

부터는 주 대사물질이 되며. 90분부터는 일정한 수준을 보여 주었다. 또한 관류액에 함유된 벤지딘이 아세틸벤지딘과 디아세틸벤지딘으로 회수되는 율은 약 70%이었다.

본 연구에서는 여러 가지 검출 대상 물질에 대하여 최대의 검출능을 발휘할 수 있는 두 종류의 검출기 동시 사용을 제안하였으며, 적출 간 관류법을 통한 벤지딘 대사물질은 아세틸벤지딘으로 확인되었다.

벤지딘 대사에 관한 앞으로의 연구는 벤지딘과 비교하여 상대적으로 반감기가 긴 디아세틸벤지딘의 연구가 활발하게 이루어져야 하며. 벤지딘계 염료를 관류시켜 적출 간 관류법에서의 벤지딘계 염료의 대사물질을 확인하는 연구도 계속하여 수행되어야 할 것으로

사료된다.

[영문]

Benzidine, an aromatic amine used primarily in manufacture of azodyes, is recognized as a urinary bladder carcinogen in humans. In rats, mice, and hamsters, chronic exposure to benzodine resulted in tumors of the liver. The present study was undertaken to suggest analyzing the metabolites of benzidine

with the optimal condition identify the metabolites of benzidine, and observe time variance of the metabolites in the isolated perfusated rat liver.

N-acetylbenzidine was synthesized by acetylation of benzidine with aceticanhydride and separated by thin layer chromatography(TCL) and high performance liquid chromatography(HPLC).

To analysis benzidine and the metabolites of benzidine, HPLC operating condition has been optimized by means of preliminary experiment. The mobile phase consisted of acetonitile(37%) in phosphate buffer(ph 6.0), flow rate maintained at 1.0 ml per min. Optimal detective conditions were electrochemicaldetector(ECD)

at 0.75 V for benzidine and N-acetylbenzidine and ultravioletdetector(UVD) at 287 nm for N,N" -diacetylbenzidine.

The perfusion system was equilibrated for 30 minutes before addition of benzidine to the perfusate. Samples of the perfusate were collected at time intervals(0,10,20,30,60,90,120min) during the 2 hour perfusion.

Before analyzing samples by HPLC/ECD/UVD, samples had been treated with sep-pak.

Samples of perfusate analyzed by HPLC/ECD/UVD and the metabolites of benzidine in the isolated perfused rat liver were N-acetylbenzidine and N,N'- acetylbenzidine.

Benzidine metabolized over 60% during the initial 30 minutes of perfusion, extensively by 1 hour, and was undetectable in the perfusate. N-acetylbenzidine and N-acetylbenzidine increased by 30 minutes of perfusion, declined.N,N'- diacetylbenzidine increased the 0-30minutes period, remained constant during the

90-120 minutes period.
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https://ymlib.yonsei.ac.kr/catalog/search/book-detail/?cid=CAT000000007108
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4. Graduate School of Public Health (보건대학원) > Graduate School of Public Health (보건대학원) > 2. Thesis
URI
https://ir.ymlib.yonsei.ac.kr/handle/22282913/117864
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