ELISA 법에 의한 typhoid fever의 혈청학적 진단에 관한 연구

Abstract

장티푸스는 아직도 우리나라에서는 자주 발생되므로 불명열 환자의 감별진단에 항상 고려의 대상이 되는 질환이다. 따라서 이의 진단을 위한 적당한 검사가 요망되나 종래 사용하여 온 Widal 시험은 그 민감도와 특이도가 낮고 항생제의 남용으로 병원균(病原菌)의

검출율도 감소되고 있는 실정이다.

Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)는 소량의 항체검출에 유용하므로 장티푸스의 혈청학적 진단에도 근래에 이 방법의 적용이 시도되어 왔다. 그러나 아직 적절한 항원 선택 여부와 진단기준의 확립이 되어 있지 못한 실정이기에 저자는 Salmonella typhi lipopolysaccharide(LPS)를 항원으로 사용하여 그 진단적 가치를 재검토하여 보았다.

본 연구에서는 세균 배양이 되어 장티푸스로 확진된 25례, 세균배양이 되지는 않았으나 임상적으로 장티푸스로 간주된 14례, 파라티푸스 환자 4례, 장티푸스 또는 파라티푸스와 감별을 요했으나 다른 병으로 진단된 38례, 류마토이드 인자 양성 환자 10례 및 건강 대조군 45례의 혈청에 대하여 S. typhi LPS를 항원으로 사용한 ELISA법으로 IgM 및 IgG항체가를 측정하여 다음과 같은 결과를 얻었다.

1. LPS항원의 최적 부착 농도는 25 ug/ml이었고 최적 혈청 희석 배수는 1 : 40이었다.

2. 배양으로 확진된 장티푸스 환자에 있어서 ELISA법의 민감도는 IgM항체는 60%, IgG항체는 92%이었고, 특이도는 IgM항체는 89.6%, IgG항체는 77.8%이었다.

3. IgM항체에 위양성을 보이는 예는 주로 류마토이드 인자 양성환자였고, IgG항체에 위양성을 보이는 질환에는 4례의 결핵 환자 및 3례의 암종 환자가 포함되어 있었다.

4. 파라티푸스 환자는 IgG항체의 흡광도치로 장티푸스 환자와 감별될 수 없었다.

5. lgG항체가 1.0이상의 높은 흡광도를 보이거나 IgM 및 IgG항체 시험에 모두 양성을 보이는 것을 장티푸스 혹은 파라티푸스의 진단 기준으로 삼을 때 민감도는 75.9%, 특이도는 95.8%, 양성검사 예측도는 91.7%, 음성 검사 예측도는 86.8%이었다.

이상의 결과를 종합하여 볼 때 S. typhi LPS항원을 사용한 ELISA법 IgM 및 IgG항체 검사는 그 특이도와 민감도가 매우 높으며 장티푸스 진단에 유용하다는 결론을 얻었다.

[영문]

Laboratory diagnosis of typhoid fever is essential for the proper management of the patient because this disease is still prevalent in Korea. Widal test has been widely used for the diagnosis of this disease but its sensitivity and specificity

are disappointing. Furthermore bacteriological culture rate is also relatively low possibly due to the indiscriminate use of anti-biotics.

Enzyme-Linked immunosorbent assay (ELISA) is an useful tool for the detection of very small amount of antibody. Therefore, this method has been tried for the serodiangosis of typhoid fever. The author reevaluated this method using lipopolysaccharide(LPS) of Salmonella typhi as the antigen in twenty-five cartes of bacteriologically proven typhoid fever, 14 cases of clinicall diagnosed typhoid fever, 4 cases of paratyphoid fever, 48 cases of nontyphoidal diseases and 45 cases of healthy control subjects.

The ELISA for anti-LPS antibody of IgM and IgG classes was performed using alkaline phosphatase conjugated anti-human globulin. It was found that the optimum coating concentration of LPS antigen was 25 ug/ml and the optimum serum dilution was 1:40. The sensitivity of ELISA for IgM and IgG were 60% and 92%, respectively.

The specificity of IgM and IgG were 89.6% and 77.9%, respectively. Among the 11 cases of false positive IgG, 4 were tuberculosis patients and 3 were cancer patients. Rheumatoid factor positive patients showed significantly high IgM level

compared to the nontyphoidal disease group. Four cases of paratyphoid fever patients showed increased IgG and whose absorbance values were not significantly different from those of typhoid fever group. It was found that in the cases either

whose IgG absorbance value is above 1.0 or both IgM and IgG absorbances were positive, the diagnostic sensitivity of typhoid or paratyphoid fever becomes 75.6%, specificity 95.8%, positive predictive value 91.7% and negative predictive value 86.8%.

Based on these results, it is certain that the ELISA method using S. typhi LPS is highly sensitive and specific for the detection of both IgM and IgG antibodies, and one could conclude that this method is an useful serodiagnostic tool for the

diagnosis of typhoid fever.