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생체외 실험적 취장염에 관한 연구

Other Titles
 Studies on experimental pancreatitis in vitro 
Authors
 이우형 
Issue Date
1982
Description
의학과/박사
Abstract
[한글]

취장염의 주요 원인인자로는 담즙, 취단백 분해효소 및 지방분해효소, 알콜등을 들 수 있으며 취장염의 기본 병인론은 취장조직의 자가소화작용이라는 설이 공통된 견해이나 과연 어떤기전에 의해 최초로 이들 효소의 활성화 과정이 나타나는 지는 정확히 밝혀지지

않고 있다.

취장염 발생 및 진행중 특징적으로 나타나는 것으로는 발병 초기에 혈액내 amylase를 비롯한 취효소의 급격한 증가를 볼 수 있으며 이외에 취장조직으로부터의 삼출액의 증가로 인한 hypovolemia, 취외분비기능의 급격한 저하등을 볼 수 있다. 그러나 생체내 실험

으로는 혈중 amylase 및 lipase변동은 쉽게 측정할 수 있으나 삼출액 변동 및 취외분비변동은 측정하기 곤란하며 취외분비변동은 주로 십이지장 내용물을 대상으로 하고 있다.

따라서 본 실험에서는 전해질용액을 관류하는 생체외 적출 고양이 취장표본을 이용하여 알콜, trypsin 및 담즙산을 취관내로 주입하여 생체외 취장염 발생을 시도하였으며 동시에 이로 인한 취외분비 및 취효소 이동을 검색코저 하였다.

실험동물로는 1.5∼2.5kg 되는 잡종 고양이를 암수 구별없이 사용하였으며 secobarbital 마취하에 보온 방석 위에서 Case등(1968)의 방법을 약간 변형하여 취장을 적출하여 Kre

bs-Ringer bicarbonate buffer(KRBB)로 관류시켰다(김등 1981).

취장염 유발실험에서 알콜은 20%, 담즙산은 1% chenodeoxycholic acid, trypsin은 5000 BAEE u/ml을 각각 3ml씩 취관내로 주입한 후 취관을 3시간 동안 폐색하였다.

취장염에서의 취외분비기능은 취장염 유발 전후에 취액분비는 secretin 주사 또는 주입으로, 취효소분비 secretin 주입하에 cholecystokinin-octapeptide(CCK-OP) 자극으로 유발시켰다. 취외분비기능외에도 취효소 이동을 관찰하기 위하여 삼출액 및 정맥배출액 (venous drainage)으로 유출되는 amylase 활성을 Bernfeld법 (1955)으로 측정하여 IU/10min으로 표시하였다.

관류실험이 끝난 다음 일부 조직은 10% formalin에 고정하고 hematoxylin-eosin 염색하여 광학 현미경으로 관찰하였다.

실험성적을 요약하면 다음과 같다.

1. 적출 고양이 관류취장표본에서 취장염 유발인자라고 지목되는 담즙산, 알콜 및 trypsin을 취관내 주입 결찰하여 실험적 취장염을 유발시킬 수 있었다.

2. Secretin자극 취액분비치는 생리적 식염수 주입결찰군에서 별 변동이 없으나 알콜, trypsin 및 담즙산 주입결찰군에서는 그 순위로 감소현상이 심하였다.

3. CCK-OP자극 취효소 분비치는 생리적 식염수 주입결찰만으로도 현저히 저하되며 알콜 및 trypsin주입군은 생리적 식염수 주입군의 반응과 비슷하나 담즙산 주입군에서는 심히 억압되어 효소분비를 거의 볼 수 없었다.

4. 취장염 발생인자의 취관내 주입결찰로 급격한 정맥 배출액의 감소와 삼출액의 증가를 나타냈으며 그 정도는 담즙산 처치군이 가장 심하고 그 다음 trypsin, 알콜 순이었다.

5. 취장염 발생으로 삼출액내로 amylase의 유출은 현저하여 주입결찰 후 1∼30분에 최고치에 달하였고, 특히 담즙산군에서 격심하였으나 정맥배출액을 통한 취효소 유출은 경미하였다.

6. 취장조직의 병리조직소견으로는 생리적식염수 또는 알콜처치군에서는 별 병변이 없으나 trypsin 주입결찰군에서는 국소괴사를, chenic acid처치군은 광범위한 실질조직괴사 병변을 나타냈다.

이상 결과로 보아 적출취장에서도 담즙산, 알콜 및 trypsin의 관내 주입결찰로 취장염 발생을 관찰할 수 있고 취외분비기능은 취장염 발생 초기에 급격히 저하되며 취효소의 조직외 이동으로 삼출액내에 고농도 개재함을 알 수 있었다.



[영문]

The ease with which pancreatitis is produced in the experimental animal is fortunately not matched in man. Nevertheless, the experimental approach has provided some clues regarding the pathophysiology of pancreatitis in man. Most studies on the pathogenesis of acute pancreatitis undertaken so far have been centered on the effects of pathogenetic factors instilled into the pancreatic duct in vivo and only few experiments were done in isolated preparations of pancreas.

Attempt was made to induce experimental pancreatitis in the isolated perfused cat pancreas with special reference to the changes of the exocrine secretory functions as well as pancreatic enzyme movement into vein and exudate.

The pancreas was isolated and perfused with Krebs-Ringer bicarbonate buffer. Pancreatitis was induced by means of obstructing the pancreatic duct for 3 hours after instilling 3ml of 20% alcohol, trypsin (5000 BAEE u/ml) or 1% chenodeoxycholic acid(chenic acid) into the duct and saline was instilled as control experiment. Secretin was injected or infused to induce pancreatic juice secretion and CCK-octapeptide (5ng) was given to evoke enzyme secretion before and after induction of pancreatitis. The volume and amylase content of the venous drainage and exudate were determined in the course of the experiment and the histopatlologic examination was done at the end of perfusion.

The results are summarized as follows:

1. Experimental pancreatitis can be induced in isolated perfused cat pancreas by means of instilling pathogenetic factors such as alcohol, trypsin and bile acid into the pancreatic duct with obstruction.

2. Secretin-induced pancreatic flow was little affected by saline instillation but it was markedly reduced by ethanol, trypsin and chenic acid in increasing order.

3. Amylase secretion evoked with CCK-octapeptide was significantly decreased by ductal obstruction regardless of instilled factors, however, chenic acid instillation caused more marked and showed scanty secretion of amylase.

4. Venous drainage was sharply decreased in vice versa the exudate was increased in trypsin and chenic acid instilled pancreas.

5. Amylase appearance into venous drainage was negligible in all groups. However, amylase leakage into exudate was extensive after intraductal instillation of chenic acid, trypsin and ethanol in decreasing order in early period and peak value was at

10∼30 minutes.

6. Histopathologic finding of pancreas showed focal parenchymal necrosis by trypsin and diffuse necrosis by chenic acid instillation but saline or ethanol caused only edematous changes.

By these findings it can be concluded that the exocrine pancreatic functions are abruptly deteriorated in experimental pancreatitis induced by intraductal instillation of ethanol, trypsin and bile acid in vitro preparation, and the pancreatic enzymes leak profoundly into exudate and not into venous drainage.
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https://ir.ymlib.yonsei.ac.kr/handle/22282913/116572
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