Tetrahymena pyriformis에 의한 마우스 복강내 대식세포의 활성화

Abstract

[한글]Tetrahymena pyriformis는 자유생활 담수 섬모충류의 일종이나 때로는 담수어의 표피, 근육층에 수의 기생하여 조직학적 병변을 일으킬 수 있는 수의 기생원충으로 알려지기도 하였다. 일면 Tetrahymena는 마우스복강 대식세포의 비특이성 활성제로서의 가치가 있음이 밝혀진 바 있어 본 실험은 한국산 Tetrahymena pyriformis (GL 주)로 처리된 마우스 복강 대식세포가 기왕에 알려진 대식세포 활성제로 처리된 대식세포와 비교하여 그 활성도를 비교하여 보고저 한 것이다.

표적 대상 기생충으로서는 Toxoplasma gondii (RH 주) 영양형을, 실험동물로는 체중 20gm 정도의 ICR 마우스를 사용하였고 대조 활성제로는 Toxoplasma 자체 추출액, polyanionic agent의 일종인 Dextran sulfate, 계면 활성제의 일종인 Dimethyldioctadecylammonium

bromide (DDA) 그리고 항원 보조제로 쓰이는 Complete Freund's adjuvant (CFA)를 사용하여 ICR 마우스 복강 대식세포의 활성도를 비교하였다. 활성도는 각 활성제로 1주일간 전처리한 마우스 복강 대식세포의 단층 배양을 실험실내에서 한 다음, 표적 기생원충을

접촉시키고 시간별로 주효세포의 탐식지수를 계산하여 표적 기생원충의 살멸효과를 평가하였다.

Tetrahymean 추출액으로 활성화된 대식세포가 화학 합성 활성제로 처리된 대식세포 보다 배양 20시간에 월등히 높은 Toxoplasma 살멸효과를 나타내었고 화학합성 활성제중에는 DDA가 높은 살멸효과를 보여 우수한 대식세포 활성제로 평가되었다. Dextran sulfate 처리의 경우에는 대조군 보다도 낮은 살멸효과를 보인 사례도 있어 본 실험에서는 표적 기생충을 살멸할 수 있는 대식세포 활성제로서의 가치가 없었다. 또한 살아있는 Toxoplasma 영양형과 열처리한 Toxoplasma 영양형을 각각 표적 기생원충으로 하였을 때 열처리한 To

xoplasma 영양형이 대식세포내에서 보다 현격히 감소되었다. 이는 표적 기생원충의 숙주세포에 대한 영향력이 없어진 상황에서 활성 숙주세포의 공격만을 받는 경우로 생각된다.

Tetraphymena pyriformis (GL 주)는 무균 배양이 가능하고 빠른 속도로 증식할 수 있으며 우수한 대식세포 활성제로서 평가됨으로 Toxoplasma 감염 억제제로서도 개발 여지가 있으나 보다 광범한 연구가 앞으로 계속되어야 할 것이다.

[영문]Tetrahymena pyriformis is a free-living ciliate protozoan in the freshwater system. Experiments were carried out to determine whether intraperitoneal administration of T. pyriformis (GL strain) to mice activates macrophages to be able to kill Toxoplasma gondii tachzoites in vitro.

Mice were also injected intraperitoneally with several synthetic activators: dimethyldioctadecylammonium bromide (DDA), dextran sulfate, complete Fround's adjuvant (CFA) as well as Toxoplasma and Tetrahymena lysates in order to activate mouse peritoneal macrophages. One week after administration of activators, peritoneal cells were harvested and the adherent macrophages were challenged with Toxoplasma tachyzoites. Macrophage monolayers monolayers were than fixed with absolute methanol after washing and stained with Giemsa solution. The percentage of the adherent, cells infected and total number of organisms per 100 macrophages were calculated to make toxoplasmacidal activity of macrophages according to the

cultivation time.

Peritoneal macrophages from mice administered with Tetrahymena exhibited significant protection against target parasites as compared with those treated with synthetic activators. Among non-biological synthetic activators, DDA was evaluated as an excellent activator.