람블편모충(Giardia lamblia) 감염에 있어 면역학적 진단법의 가치에 관한 연구

Abstract

[영문]

[한글]

람블편모충을 Diamond's TPS-1 배지에서 무균배양하여 그 영양형을 사용하여 Enzyme-Li

nked Immunnosobent Assay(ELISA로 약기함)와 간접형광항체법을 시행하여 람블편모충 감

염증에 대한 이들 면역진단법의 성적을 비교 검토하였다.

무균배양된 람블편모충 영양형을 ultrasonicator로 세포막을 파괴시키고, 원심 침전하

여 그 상충액을 항원으로 사용하여 polystyrene microplate에 부착시키고 시험 혈청과 반

응시킨 후 여기에 peroxidase conjugated antihuman IgG(Cappel Lab., U.S.A.)를 반응시

켰다. Peroxidase의기질로 ortho-phenylenediamine (OPD)과 H^^2 O^^2를 사용하여 ELISA

를 시행하였다. Conjugate의 적정 희석도는 1 : 10,000, 항원은 1 : 300, 시험 혈청은 1

: 200이었다. 람블편모충에 감염된 환자에서 혈청의 항체가(0.62±0.024)는 건강대조군(0

.27±0.016)과 비교할 때 그 차이가 유의하였다(P<0.001), 그러나 람블편모충에 감염되어

있는 환자중 설사를 호소하는 군과, 설사를 호소하지 않는 군 사이에 그 항체가의 차는

유의하지 않았고, 이질아메바 중복감염이 람블편모충에 대한 ELISA항체가에 영향을 주지

않았다.

배양된 람블편모충 영양형을 1% formaldehyde로 고정하여 만든 항원을 사용하여 간접형

광항체법을 시행하였으며 conjugate로는 형광표식 antihuman IgG(Hyland)를 사용하였다.

형광항체가에 있어서도 람블편모충 감염자(24.37±1.88)와 건강대조군(3.07±0.47)과의

차는 유의하였다(P<0.001). 또한 람볼편모충 감염자중 설사를 호소하는 환자와 호소하지

않는 환자에서의 형광항체가는 그 차가 유의하지 않았으며 람블편모충에 대한 형광항체가

는 이질아메바 중복감염에 의하여 영향을 받지 않음을 알 수 있었다.

람블편모충에 감염된 환자를 대상으로 시행한 ELISA와 간접형광항치법에 의한 각각의

항체가는 그 상관성이 있었으며, 그 상관계수 γ=0.7275였고, 회귀 방정식은 Y=0.389+0.O

O8X였다.

이상의 결과로 보아 람블편모충 감염에 대한 ELISA와 간접형광항체법의 진단적 가치가 인

정되며 역학적 조사연구나 집단검진에 이용될 수 있을 것으로 생각되며 이들 면역진단법

의 보다 면밀한 검토가 요구된다.

Study on Diagnostic Efficacy of Enzyme-Linked Immunosorbent Assay and

Immunofluorescence Test in Giardiasis

Jung-Soo Kim

DePartment of Medical Science The Graduate School, Yonsei University

(Directed by Professor Keun-Tae Lee, M.D.)

Diagnosis of giardiasis is made by finding cysts or trophozoites in diarrheic or

formed stools. The recommended diagnostic procedure requires the examination of at

least three different stool samples because of the fluctuation of the cyst number

in fecal samples. Recently in uitroaxenic cultivation of Giardia lamblia

trophozoites (Meyer, 1976) have led an immunodiagnostic tool. Visvesvara et

at.(1980) reported the presence of serum antibodies to Giardia lamblia by

immunofluorescence test in giardiasis patients. Smith et at.(1981) demonstrated IgG

antibody to Giardia lambia by enzyme-linked immunosorbent assay.

The present study is aimed to define the diagnostic efficacy of engrme-linked

immunosorbent assay(ELISA) and indirect immunofluorescent antibody test (IFAT) in

giardiasis.

Giardia lamblia trophozoites cultured axenioally in the modified Diamond's TPS-1

medium were used for the performance of ELISA and IFAT.

The trophozoites were disrupted by ultrasonicator, and the supernatant after

centrifugation was uses aa antigen for ELISA. Peroxidase conjugated antihuman IgG

(Carpel Lab.), and orthophenylene diamine and H^^2 O^^2 as substrate were used.

Serum antibody titres in the giardiasis patients were significantly elevated

comparing with that in the healthy control group (p<0.001). The Entamoeba

histolytica infection did not affect the antibody titre of the Giardia lamblia.

IFAT with Giardia lamblia trophozoites as antigen was carried out to detect

antibody in the patient's serum. The fluorescent antibody titres in proved

giardiasis cases were higher than that of the healthy control group (p<0.001), The

distribution of the antibody titre in giardiasis alone did not different from that

of giardiasis with Entamoeba histolytica infection.

A comparison has been made between ELISA and IFAT in detection and quantification

of antibody in giardiasis. There wha significant correlation between the two tests

in known giardiasis cases in the antibody quantification : correlaiton coefficient

was 0.7275%, and equation of the regression line was Y=0.389+0.008X.

The diagnosis utilizing ELISA and IFAT was recognized as the useful tools for

screening of the Giardia infection.