46 300

Cited 0 times in

A형 혈우병 환자에서 polymerase chain reaction을 이용한 factor VIII유전자의 haplotyping과 임상진단에의 이용

Other Titles
 Haplotyping of the factor Ⅷ gene in hemophilia A using the polymerase chain reaction and its clinical application 
Issue Date

[영문] [한글] A형 혈우병을 유전자 수준에서 진단하는 방법의 유용성에 관한 연구를 하기 위하여 정 상군과 환자군의 말초혈액으로부터 deoxyribonucleic acid (DNA)를 분리하였으며, 보인자 감별과 산전 진단에의 응용을 위해서 환자를 포함하고있는 가족들의 말초혈액을 채취하 고, 임신 10-12주된 보인자 태아의 융모악의 융모를 채취하여 보인자의 말초혈액과 융모 에서 DNA를 분리하였다. 분리한 DHA시료를 이용하여 polymerase chain reaction (PCR)법 으로 DNA를 증폭한 후 Bcl I과 Hind Ⅲ를 이용한 restriction fragment length polymorph ism (RFLP)의 haplotyping을 실시하였다. 제8응고인자 유전자내의 intervening sequence (IVS) 18에 Bcl I polymorphic site가 존재하지 않으면 490 bp 크기의 allele (haplotype B)를 보였으며, Bcl I polymorphic site 존재시에는 325 bp (haplotype bl)와 165 bp (h aplotype b2)의 allele를 보였다. 한편 Hind Ⅲ RFLP의 경우 제8응고인자 유전자내의 IVS 19에 Hind Ⅲ polymorphic site가 존재하지 않으면 400 bp allele (haplotype H)를 보였 으며, Hind Ⅲ polymorphic site 존재시에는 280 bp (haplotype hl)와 120 hp(haplotype h2)의 allele를 보였다. Bcl I RFLP와 Hind Ⅲ RFLP에 대한 각 allele의 빈도를 분석한 결과 정상군과 환자군에 있어서 통계적으로 유의한 차이가 없었으며 대립인자 Bcl I polymorphism의 (+ / -)의 빈도는 0.84 / 0.16의 빈도로 나타났고, Hind Ⅲ polymorphism의 (+ / -)의 빈도는 0.16 / 0.84를 보였다. 대립인자 빈도에 따른 heterozygosity를 측정한 결과 Bcl I과 Hind Ⅲ RFLP에 대한 heterozygosity는 정상인에서 모두 26.9%로서 다른 인종에 비해서는 낮은 수 치를 보였다. Haplotype을 분석한 결과는 Hind Ⅲ / Bcl I (- / +)의 haplotype은 전체의 81.1%를 보였고 Hind Ⅲ / Bcl I (+ / -)의 haplotype은 18.9%를 보여서 Hind Ⅲ와 Bcl I polymorphic site사이에는 linkage disequilibrium이 존재하였다. 이상의 결과를 토대로 A형 혈우병 환자가 있는 가족을 대상으로 보인자 감별과 산전 진 단을 실시한 결과 어머니의 haplotype이 Hind Ⅲ나 Bcl I RFLPs에 대해 heterozygosity를 나타낼 경우 임상진단에의 이용이 가능함을 알 수 있었다. Haplotyping of the factor Ⅷ gene in hemophilia A using the polymerase chain reaction and its clinical application Eun Kyeung Kim Dept. of Medical Technology The Graduate School Yonsei University Hemophilia A is the most common inherited bleeding disorder in man. The disease is caused by a defect in the factor Ⅷ gene. A genetic marker in the form of a restriction fragment length polymorphism (RFLP) within the factor Ⅷ gene would serve as a tag for the hemophilia A gene, thus allowing both accurate carrer detection and improved earlier prenata ldiagnosis followed by chorionic villi sampling. The polymorphic site of Bcl Ⅰ and Hind Ⅲ RFLPs of the factor Ⅷ genge is located in the eithteenth and nineteenth intron, respectively. In the present study, the poltmerase chain reaction (PCR) was used to amplify the target sequences including two polymorphic sites. Haplotype for each RFLP was identified after the cleavage of amplified products with Bcl Ⅰ and Hind Ⅲ restriction enzymes. The frequency for the Bcl Ⅰ and Hind Ⅲ polymorphism was determined in 53 normal individulas and 192 patients with hemophilia A. The allele frequency of Hind Ⅲ RFLP were 0.16/0,\84 (+ / -) and the heterozygosity was 0.269. The allele frequency of Bcl Ⅰ RFLP were 0.84 / 0.16 and the heterozygosity was 0.216. It was revealed that there was a tight linkage (linkage disequilibrim) between the Hind Ⅲ and BclⅠ polymorphisms. The result also showed that two intragenic RFLPs of the factor Ⅷ gene are useful for carrier detection and prenata ldiagnosis in Korean families with hemophilia A.
Files in This Item:
제한공개 원문입니다.
Appears in Collections:
7. Others (기타) > Others (기타) > 5. Others
사서에게 알리기


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.