아닐린과 벤지딘을 동시 투여한 흰쥐의 헤모글로빈 부가체 형성에 관한 연구

Abstract

[한글]

장기간 노출에 대한 누적평가와 동일시료를 반복하여 채취할 수 있고 시료채취 시간에 영향받지 않는 혈중 헤모글로빈 부가체를 이용하여 아닐린과 벤지딘 내부노출 평가를 실시하였다.

본 연구에서는 방향족 아민들의 혈중 헤모글로빈 부가체 형성을 파악하고자 아닐린, 벤지딘 단독 투여군과 동시 투여군, Direct Black 38 투여군으로 나누어 흰쥐에 경구투여한 후 각각 2, 6, 24, 48, 72시간에 혈액을 채취하였다. 혈액내에서 헤모글로빈을 분리한 후 가수분해에 영향을 미칠 수 있는 조건을 평가하고 평가된 방법 중 가장 적합한 가수분해 방법을 선택하여 HPLC/ECD와 UVD를 이용하여 분석하였다.

실험결과 아닐린과 벤지딘, 아세틸벤지딘이 헤모글로빈내 시스테인 SH기와 결합이 가능하였고 Direct Black 38에서도 아조결합의 환원반응으로 아닐린과 벤지딘이 검출되었다.

이들을 동시분석하기에는 6 M HCι을 가한 후 환원제를 첨가하여 고온에서 가수분해한 방법이 가장 적합하였고 아닐린과 벤지딘에 동시 노출된 경우 아닐린의 헤모글로빈 형성에 있어 벤지딘에 의한 영향은 없었다. 그러나 벤지딘의 경우 아닐린에 의해 아세틸반응이 증가하며 아세틸벤지딘의 양을 증가시켰다. 따라서 아닐린과 벤지턴을 동시에 사용하는 제조업체에 대한 평가시 벤지딘 뿐만 아니라 아닐린의 평가도 반드시 병행하여야 할 것이며 앞으로 아닐린의 농도 증가에 따른 아세틸 벤지딘 헤모글로빈 형성에 대한 연구도 필요하다.

[영문]

Internal exposure monitoring by hemoglobin adducts in blood can assess the long-term exposure of chemicals and it is not affected by collection time.

Aniline, benzidine and Direct Black 38 was given to rats orally.

Blood sample was obtained at 2, 6, 24, 36, 48, and 72 hr, respectively after adminstration. Rat hemoglobins were isolated and hydrolyzed in 6M HCI with reducing agent at temperature of 50℃.

Hydrolyzed amines were extracted by methanol after passing through Sep-pak and then quantified by High Performance Liquid Chromatography with electrochemical detector and ultra-violet detector.

We obtained following results, Aniline, benzidine and acetylbenzidine bound with SH radical of hemoglobin.

In the group of both aniline and benzidine administration, aniline increased in acetylation of benzidine. So acetylbenzidine was accumulated more in vivo than group of the dosed with only benzidine.

In the Direct Black 38 treatment group, aniline and benzidine which could be produced by metabolic auto reduction of tissues or interstinal flora were detected, but acetylbenzidine was not detected. It is identified that the dosed amount of Direct Black 38 is very small.

Patter of progress aniline-Hb and benzidine-Hb in exposed direct Black 38 is similar to aniline-benzidine dosed group.

Therefore, at the biomonitoring for the workplaces where both of aniline and benzidine are used, it is necessary to evaluate not only benzidine and acetylbenzidine, metabolite of benzidine, but also aniline.