Ig G Anti-A/B 역가측정을 위한 Ig M Anti-A/B 불활성 방법의 비교

Abstract

[한글]

1992년 연세의료원에 내원한 외래 환자중 무작위 추출에 의한 30명의 0형 혈액형 환자애서 세가지 시약으로 IgM anti-A 와 anti-B를 불활성화시킨 후 각각애서 Ig G anti-A, anti-B 의 역가를 측정하여 IgM 불활성화 방법의 장단점을 평가하였다.

Ig M anti-A,anti-B 불활성화를 위한 시약으로는 0.01 M dithiothreitol (DTT), 2-mercaptoethanol (2-ME), Neutr AB(R)를 각각 사용하였다. IG M 을 불활성 시키는 방법은 0.01 M DTT 는 혈청과 동량으로 섞어 37℃ 온수조에서 2시간 반응시켰고, 0.2 M 2-ME 용액은 혈청과 동량으로 섞어 37℃ 온수조예서 1시간 반응시켰으며, 항체 중화법 재제인 Neutr AB(R)로는 실온에서 15분간 반응시켰다. 세시약으로 처리된 각 혈청을 배수희석하여 간접 항글로볼린법으로 Ig G 역가를 anti-A 와 anti-B 에 대해 각각 측정하여 다음과 같은 결

론을 얻었다.

1. 세방법으로 IgM 을 불활성화 시킨 후 각각 측정한 IgG Anti-A,Anti-B 역가의 분포는 IgG anti-A 는 1:16 부터 1:2048 까지 측정되었으며 anti-B 는 1:16 부터 1:1024 까지 측정되었다. 또한 세방법에 모두 중앙값은 anti-A 가 1:128 이었고, anti-B 는 1:64 로

일치하였다.

2. IgG anti-A, anti-B 역가 일치율은 DTT와 2-ME 처리 후 측정한 경우가 86%, DTT 와 NeutrAB 로 처리한 후가 86% 였으며 2-ME 와 NeutrAB 로 처리한 후의 역가는 70% 의 일치율을 보였다.

IgG anti-B 의 역가 측정시 DTT 와 NeutrAB 간의 일치율과 DTT와 2-ME 간의 일치율이 각각 90%였으나 2-ME 와 NeutrAB 간의 일치율은 76% 였다. 그러나 세 방법의 결과에서 anti-A 측정시 DTT 와 NeutrAB 처리한 경우의 일치율 76%를 제외하고는 방법간의 통계적인

유의한 차이는 없었다 (p>0.05).

3. IgM anti-A 역가의 중앙값은 1:256, 평균간은 1:564였으며 그 범위는 1:32 부터 1:4096 까지 측정되었다. IgM anti-B 의 역가는 중앙값이 1:128, 평균값이 1:289 였고 범위는 1:32 부터 1:2048 까지 측정되었다. 또한 IgG 역가가 IgM 역가보다 높이 측정된 검체

는 불활성화 방법에 따라 약간의 차이는 있었으나 7-46%의 검체에서 관찰되었다.

이상을 종합해 볼때 Ig M anti-A,anti-B 를 불활성화 시키는 방법으로는 0.01M DTT 환원법, 2-ME 환원법, NeutrAB 중화법 등 어느 방법을 선택하던 IgG anti-A 와 anti-B 역가의 결과에는 차이가 없음을 알 수 있었다. 따라서 각 임상 검사실에서 세 방법중 어느 방

법을 선택해도 무방할 것으로 여겨졌으나 검사하는 동안 0.01M DTT 환원법이 임상 검사실에서 사용하기에 가장 무난한 방법으로 생각되었다.

[영문]

Three methods were evaluated for their inactivation capability of IgM anti-A and IgM anti-B in sera: 1)0.71 M dithiothreitol(DTT) with equal volume of serum was incubated for 2 hours at 37℃, 2)0.2 M 2-mercaptoethanol (2-ME) with equal volume of serum was incubated for 1 hour at 37℃, and 3)NeutrAB with 5 volume of serum was incubated 15 minutes at room temperature. Thirty samples of group 0 blood were randomly selected and tested by the methods. For IgG anti-A and IgM ansi-B

titration, indirect antiglobulin method was used.

1. After the inactivation of IgM anti-A and IgM anti-B by the methods, the titers ranged from 1:16 to 1:2048 and from 1:16 to 1:1024 for IgG anti-A and IgM anti-B, respectively. The median values were all same in the three methods (1:128 for IgG

anti-A and 1:64 for IgG anti-B).

2. The concordances of the IgM anti-A between two methods were 86% for the DTT method and the 2-ME method, and also for the DTT method and the NeutrAB method, and 70% for the 2-ME method and the NeutrAB method. The concordances of the IgM anti-B between two methods were 90% for the DTT method and the 2-ME method, and also for the NeutrAB method. Except for the concordance between the DTT method and the NeutrAB method, the concordances of other combinations were not statistically significant (p>0.05).

3. The titers of IgM anti-A and IgM anti-B ranged from 1:32 to 1:4096 (median 1:256, mean 1:564) and 1:32 to 1:2048 (median 1:128, mean 1:289), respectively. The sera with higher titer of IgG than the titer of IgM were observed in 7-46%.

Though there were no significant differences among the three methods for the inactivation of IgM anti-A and anti-B in the serum, the DTT method was considered as a resonable method to use in a clinical laboratory.