Trypan blue투여로 인한 흰쥐 태아의 염색체 변화에 관한 실험적 연구

Abstract

[한글]

인간에서 수종의 선천성 증후군들은 염색체의 이상을 동반하고 있다는 사실은 잘 알려져 있으며, 특히 비뇨기계의 선천성 기형을 동반한 예도 보고되고 있다.

최초의 비뇨기계의 기형유발실험으로 1929년 Bagg가 방사선 조사로 인한 흰쥐 태아의 수신증을 포함한 수종의 비뇨기계 기형의 발생에 대한 보고이래, 인간에서는 비뇨기계 기형의 유전성 여부에 대한 논의가 있어 왔으며, 동물에서는 실험적 보고가 있어 왔다.(Der

inger 및 Heston, 1956 ; Monie 등, 1957 ; Roux 및 Dupuis, 1961 ; Fujikura, 1969)

한편 1853년 Watson-Crick model에 의한 유전인자인 DNA의 정체와 구조가 밝혀진 이래, 유전인자의 포용체인 염색체의 형태이상과 선천성 기형을 함께 관찰하려는 경향이 고조되고 있어 실험적으로 최기원(teratogen)을 이용한 기형의 유발과 염색체의 변화에 관한

보고가 있어 왔다. (Ingalls 등, 1963 ; Soukup 등, 1967 ; Joneja 및 Ungthavorn, 1968 ; Roux 등, 1970). 그러나 그 정확한 관계에 대하여는 아직도 의문의 여지가 많아서 논란의 대상이 되고 있다.

이에 저자는 많은 연구자의 보고를 바탕으로, 지금까지 시도되지 않았던 방법으로, 비뇨기의 전구체인 중배엽 분열시기와 Mesomephric tubule 형성시기 직전에 분명히 최기원으로 알려진 trypan blue를 Sprague-Dawley계 임신 흰쥐에게 투여하여 약물의 용량과 투여시기에 따른 태아의 임신중의 상태와 비뇨기계 기형 및 모체와 태아의 염색체의 이상을 동시에 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다.

1. 임신중 특정약물의 투여는 용량이 증가하면 태아의 흡수, 발육저하, 염색체 이상을 초래하며 투여시기가 용량보다 크게 영향을 미치고 있었다.

2. 임신중 특정약물의 용량이 증가하고 투여시기가 이를수록 흡수되는 태아는 자성이었으며 웅성의 출현이 많았다.

3. 선천성 수신증은 약물의 용량보다는 투여시기가 큰 영향을 주어 발생하였으며 그외의 비뇨기 기형은 용량이 많은 영향을 주어 발생하였다.

4. 염색체 이상은 모체에서는 약물의 용량이 증가할수록, 태아에서는 투여후 경과된 시간이 짧을수록 많이 나타났다.

5. 특정약물의 투여로 인한 모체나 태아의 염색체 이상은 서로 유사하였다.

이상의 결과로 미루어 보아 최기원인 trypan blue는 Sprague-Dawley계 임신 흰쥐의 모체 및 태아에게 공히 염색체 이상을 야기시키며 태아에서 선천성 비뇨기계 기형을 유발하는 것으로 사려된다.

[영문]

It is now well known that several human congetial syndroms are accompanied by chromosomal aberrations. Chromosomal aberrations can also be induced by several teratogenic ahents in various species of animals when exposed to these agents at certian embryonic development (Ingalls et al., 1963 ; Soukup et al.,1967 : Joneha and Ungthavorn, 1968 : Roux et al., 1970).

A hereditary component in the etilogy of urinary tract malformations has been reported in man and animals (Bagg, 1929 : Deringer and Heston, 1956 ; Monie et al., 1957 ; Roux and Dupuis, however, is difficult to in man, and even the major cases of congenital hydronephrosis is still unknown. The main purpose of this investigation is to determine whether trypan blue which induces congenital anomaly of urinary tract in rat embryos would also indece chromosomal aberrations in the embryos and the mothers.

Sprague-Dawley strain healthy females rats were examined for the psermatozoa in the vagimal smears everyday. Trypan blue solution 1.5% was injected subcutaneously with various doses at different developmental stages of rat embryos.

For embryonic studies, the animals were killed on the 20th day of gestation. The total implantations, resorption rates and sex ratios were examined. Under the stereomicroscope, anomalies such as hydronephrosis, renal hypoplasis and agenesis, and anomaly of location, position and rotation of the kidney were examined through the micro-dissection method and comfirmed histologically.

For chromosomal studies, the bone marrow cells of mothers and the liver cells of fetuses were examined cytogenetically by means of the culture method of Roux et al.(1970).

From the data obtained, results were as follows ;

1. Resorption of fetuses, growth retarding effects and chromosoal aberrations of fetuses were increased following the increased doses of trypan blue, but time of injection was more important in production of the malformations.

2. Following the increased doses of trypan blue and early injection, male fetuses were more produced. So it seemed that female fetuses were easily resorpted.

3. The timing of injection with trypan blue exerted greater influence upon the indecement of hydronephrosis than the doses of the chemical, but in cases of other malformations, vice versa.

4. In mothers chromosomal aberrations were related with the deses of the teratogen, but in fetuses, with the timing of injection.

5. So fas so trypan blue is concerned, it is probable that there is a close relationship between chromosomal aberration and teratogencity