요단백 분석에 있어 Micro-Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel 전기영동 응용에 관한 연구

Abstract

[한글]

단백뇨 검사의 임상적 의의는 정량과 함께 그 분자적 구성을 규명함으로서 조기에 신장의 손상부위를 판별해 내는데 있다(Boesken, 1987). 그리고 신질환의 성질과 중증 정도를 평가하고 예후를 판정하는데 도움을 준다. 그러기 위해 검사실에서 흔히 시해하는 검사

로는 24시간뇨중의 총 단백정량, 요단백 전기영동 및 선택지수(selective protein index) 검사 등이 있으나 아직 모두 만족스러운 방법이 못된다.

이에 저자는 단백뇨의 분자량에 따라 분획할 수 있는 micro-sodium dodecyl sulfate-poluacrylamide gel 전기영동법(M-SDS-PAGE)을 이용하여 요단백 분석 방법의 임상적 유용성과 실현 가능성을 검토하기 위해 이 연구를 하였다. 이 연구는 임상에서 선택지수 검사를 의뢰한 요검체를 대상으로 micro-수직평판-SDS-PAGE 결과 및 gel 상에 출현한 단백분획 양상으로 사구체성 단백뇨, 세뇨관성 단백뇨 그리고 혼합형단백뇨를 구분하여 선택지수와 비교해 보았다.

그 외 신기능 검사로 흔히 이용하는 생화학 지표인 혈청 creatinine, 24시간뇨 creatinine, 24시간 요총단백, 알부민 등과 비교하여 다음과 같은 결론을 얻었다.

1. 각 군의 평균 선택지수는 세뇨관성 단백뇨군이 0.13, 혼합형이 0.72 사구체성이, 0.60으로 세뇨관성 단백뇨군이 가장 낮았지만 각군간에는 유의한 차이가 없었다(p>0.05).

2. 각 군의 평균 24시간 요알부민에 있어 사구체성 단백뇨군이 혼합형보다 더 낮게 나왔다(p<0.05).

3. 각 군의 평균 혈청 creatinine 치에 있어 혼합형이 다른 군보다 더 높았다(p<0.05).

4. Creatinine clearance 치와 24시간 요단백치의 평균은 세뇨관성, 사구체성, 혼합형 순으로 높았다. 24시간의 creatinine치 평균은 세뇨관성, 혼합형, 사구체성 순으로 높았다. 이들모두 유의한 차이는 보이지 않았다(p>0.05).

이상의 실험 결과에서 선택지수로는 세뇨관성 단백뇨 사구체성 단백뇨, 그리고 혼합형 단백뇨의 구별이 안되었지만 M-SDS-PAGE로는 이것이 가능했다.

M-SDS-PAGE는 단백에 대한 예민도가 높고 경제적이고 조작하기 간편하다. 또한 선택지수가 48시간 후에야 최종 결과를 낼 수 있는데 반해 M-SDS-PAGE는 2-3시간내에 결과가 나옴으로 임상 실험실에서 통상적인 단백뇨 감별 진단법에 유용하다고 생각되었다.

[영문]

Testing for proteinuria to examine constituent elements by quantitative urine analysis aids in determing the lesions of the kindney at an earlier stage.

Also this analysis is helpful in evaluating the characteristics of the kidney disease and indicates the degree of seriousness, and prognosis of the convalescence.

Therefore this analysis includes 24 hours urine protein, urine protein electrophoresis, selective protein index. These tests are frequently performed in the general laboratory, but they are not sufficient for the total diagnosis.

Accordingly, the author investigated the micro-sodium dodecyl

sulfate-polyacryamide gel electrophoresis (micre-SDS-PAGE) method which can differentiate according to the molecular weight of urine protein, and evaluated reliability of this method for clinical use.

Urine samples from a number of clinics were given the selective protein index test and classified as giomerular proteinuria, tublar proteinuria and glomerulotubular proteinuria.

Using the appearance of the pertein partition results on the gel phase from the micro-vertical salb gel SDS-PAGE, the urine samples were classified and these results were compated with the selective protein index.

In addition serum creatinine, 24 hours urine creatinine and 24 hours urine albumin tests and biochemical indices frequently used for the kidney function tests were run on the samples.

The results are summarized as follows.

1. There was no significant difference in the average selective protein index of each group (P>0.05).

2. With respect to the average 24 hours urine albumin, the glomerular proteinuria group results were lower than those of the glomerulotubular proteinuria group (P<0.05).

3. With respect to the average serum creatinine, the glomerulotubular proteinuria group's results were higher than the other (P<0.05).

4. The average creatinine clearance and urine protein values incerased with tubular proteinuria, glomerular proteinuria and glomerulocubular proternuria.Average 24hr. creatinine values, tubular, glomerulotubalar and glomerular proteinuria were higher in that order, however, no satistically significant differences could be found (P>0.05).

According to the results of this experiment, tubular proteinuria, glomerular proteinuria and glomerulotubular proteinuria are distinguishable through the use of SDS-PAGE, even though they are not distingusishable when the selective protein

index is used.

Micro-SDS-PAGE is highly sensitive to protein, and it is also economical and easy to manipulate.

The adventage of Micro-SDS-PAGE is that it can give final result within 2-3 hours where as the selective protein index takes 48 hours to produce final results. Consequently it can be a very useful diagnositic method, which can be frequently and easily used in clinics.