베체트병 환자의 혈청인자가 혈관 내피세포 유착분자의 발현과 T 림프구의 혈관 내피세포 유착에 미치는 영향

Abstract

[한글]

베체트병은 여러 기관을 침범하는 만성 재발성 염증성 질환으로 아직까지 병인이 확실히 밝혀져 있지 않으나 임상 및 병리조직학적으로 혈관염이 주된 소견으로 발병기전에 혈관 내피세포가 중요한 역할을 할 것으로 생각되고 있다. 최근엔 베체트병 환자의 혈청에서 혈관 내피세포에 대한 자가항체의 검출에 관한 보고들이 증가하고 있다. 그러나 베체트병에서 항혈관 내피세포 항체의 임상적 의의나 역할에 대해서는 알려진 바 없다.

본 연구에서는 베체트병의 발병기전에 인체진피 미세혈관 내피세포(human dermal microvascular endothelial cells: HDMEC)에 대한 자가항체의 역할을 알아보고자 배양한 HDMEC에 항내피세포 항체가 포함된 베체트병 환자의 혈청을 첨가 후 면역형광 유량 세포분석과 효소 면역표지법으로 HDMEC 표면 세포유착분자 발현 변화를 관찰하고 HDMEC에 대한 T 림프구 유착실험을 시행하여 다음과 같은 결과를 얻었다.

1. HDMEC 표면단백에 대한 효소 면역표지 검사상 75명의 베체트병 환자중 42명(56%)에서 HDMEC에 대한 혈청 IgM 항체를 검출하였으며, IgM 순환항체가 양성인 경우 혈전정맥염과 동반된 예가 많았다.

2. IgM 항체 양성인 15명의 베체트병 환자를 대상으로 시행한 효소 면역 표지검사상 혈청을 첨가하고 배양한 HDMEC표면에서 intercellular cell adhesion molecule-1(ICAM-1) 분자 발현이 모든 환자에서 자극 전에 비해 유의하게 증가하였고 93.3%의 환자에서 vascular cell adhesion molecule-1(VCAM-1)분자 발현이 유발되었고 100%의 환자에서 I-selectin 분자 발현이 유발되었다.

3. IgM 항체 양성 베체트병 환자의 혈청을 첨가 후 배양한 HDMEC표면에서 ICAM-1과 VCAM-1 분자 발현은 1시간 후부터 증가하여 16시간에 최대치에 도달한 후 감소되었으며, E-selectin 분자 발현은 1시간 후부터 증가하여 4시간째에 최대치에 도달하였다가 그후 감소하였다.

4. IgM 항체 양성인 베체트병 환자의 혈청을 첨가 후 HDMEC에 대한 T 림프구 유착도는 정상 건강인의 혈청과 IgM 항체 음성인 베체트병 환자의 혈청첨가시에 비해 유의하게 증가하였다.

5. IgM 항체 양성인 베체트병 환자의 혈청을 첨가 후 배양시간에 따른 T 림프구의 유착 변화를 보면 자극 1시간 후에 T 림프구의 유착정도가 유의하게 증가하기 시작하였으며, 자극 4시간 후에 최대치에 도달하였다가 그후 감소하여 48시간 후에는 정상치로 환원되었다.

이상의 결과로 보아 베체트병 환자 혈청내의 HDMEC에 대한 자가항체가 혈관 내피세포 유착분자의 발현 변화를 유도하고 T 림프구 유착을 조절함으로써 베체트병에서 혈관염의 발병에 관여할 것으로 생각된다.

[영문]

Behcet's disease is a chronic, multisystemic disorder characterized by recurrent inflammatory reaction. Its etiology or pathogenesis has not been clarified. Clinically, recurrent thrombophlebitis, thrombosis or vasculitis frequently occurs in patients with Behcet's disease. Microscopically, perivascular lymphocytic and histiocytic infiltrate, endothelial cell swelling and even partial vascular occlusion are observed in the skin lesions of Behcet's disease. These findings suggest that vascular damage has an important role in the pathogenesis of Behcet's disease,

In this study, we have detected the effects of the serum of Behcet's disease patients on the expression of endothelial cell adhesion molecule and the adhesion of T-lymphocytes of vascular endothelial cells by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) and immunofluorescence flow cytometric analysis.

The results are as follows.

1. Using IgM-ELISA, we have found 42(56%) out of 75 Behcet's disease patients having sera IgM antiendothelial antibody(IgM-positive). There were no significant differences between the IsM-positive and -negative patients with Behcet's disease in clinical manifestations. However, the percentage of thrombophlebitis was higher in IgM-positive group when compared with the IgM-negative group.

2. All of the 15 IgM-positive patients with Behcet's disease had an increased expression of intercellular cell adhesion molecule-1(ICAM-1) on human dermal microvascular endothelial cells(HDMEC) and 93.3% of the serum induced vascular cell adhesion molecule-1(VCAM-1) and 100% of senlm induced the E-selectin molecule.

3. After stimulation of HDMEC with sera from IsM-positive patients with Behcet's disease, the expression of ICAM-1 and VCAM-1 on HDMEC increased significantly at 4 hours, reaching a peak at 16 hours. Expression of E-selectin was induced at 1 hour

after stimulation with a peak at 4 hours and then it decreased.

4. Adherence of T lymphocytes to HDMEC increased significantly after stimulation with sera of IgM-positive patients with Behcet's disease.

5. After stimulation with sera of IgM-positive patients with Behcet's disase, adherence of T lymphocytes to HDMEC increased at 4 hours and returned to its normal level at 48 hours.

The results show that IgM positive sera of Behcet's disease patients are capable of stimulating HDMEC to increase the expression of ICAM-1, VCAM-1, and E-selectin on the cell surface and thereby to promote adherence of T lymphocytes. The whole process may play an important role in the pathogenesis of vasculitis in Behcet's disease.